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一种武夷山岩茶提取物及其制备方法和应用.pdf

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一种 武夷山 提取物 及其 制备 方法 应用
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摘要
申请专利号:

CN200910198637.5

申请日:

20091110

公开号:

CN102047997A

公开日:

20110511

当前法律状态:

有效性:

有效

法律详情:
IPC分类号: A23F3/18,A61K36/185,A61K8/97,A61P39/06,A61P3/10,A61P25/00,A61P17/00,A61Q19/02 主分类号: A23F3/18,A61K36/185,A61K8/97,A61P39/06,A61P3/10,A61P25/00,A61P17/00,A61Q19/02
申请人: 上海市新文达生物科技有限公司
发明人: 刘桂云,骆峰,骆滨
地址: 201203 上海市浦东张江高科技园区碧波路518号310室
优先权: CN200910198637A
专利代理机构: 上海智信专利代理有限公司 代理人: 薛琦;朱水平
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法律状态
申请(专利)号:

CN200910198637.5

授权太阳城集团号:

法律状态太阳城集团日:

法律状态类型:

摘要

本发明公开了一种武夷山岩茶提取物的制备方法,其包含下列步骤:(1)将武夷山岩茶用乙醇水溶液提取;(2)将步骤(1)提取所得物质用大孔树脂柱进行分离,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.16~0.45的馏分,即可。其还可包含下列步骤:将步骤(2)所得的物质进行硅胶柱层析分离,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比8∶3∶1,Rf值0.44,Rf值0.27和Rf值0.16的三个馏分中的一个或多个馏分。本发明还涉及上述提取物及其应用。本发明的武夷山岩茶提取物性质稳定、水溶性好,并且与现有的茶多酚苷元相比性质更稳定,活性更高。

权利要求书

1.一种武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于包含下列步骤:(1)将武夷山岩茶用乙醇水溶液提取;(2)将步骤(1)提取所得物质用大孔树脂柱进行分离,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.16~0.45的馏分,即可。2.如权利要求1所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:所述的武夷山岩茶原料包括武夷山大红袍、乌龙茶、铁观音、白鸡冠、水金龟、不见天、金钥匙、醉海棠、醉洞宾、钓金龟、凤尾草、玉麒麟、一枝香、瓜子树、金钱、竹丝、金柳条、倒叶柳、迎春柳、不知春、肉桂、石乳香和白麝香中的一种或多种。3.如权利要求1所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述的武夷山岩茶为粉碎后使用,粉碎后的粒径为20~100目;所述的乙醇水溶液的体积浓度为30~90;所述的武夷山岩茶与乙醇水溶液的料液比为5g∶1ml~10g∶1ml;所述的提取的温度为40~70℃,提取的方法为旋转提取,提取太阳城集团为1~3小时。4.如权利要求1所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:步骤(1)中还包含下列步骤:将提取所得的提取液过滤,收集滤液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,得滤液,即可。5.如权利要求1所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述的大孔树脂为D101和/或D201大孔树脂,上柱原料的重量与大孔树脂的重量比为1∶1.5~1∶1。6.如权利要求1所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:大孔树脂分离的步骤为:先用蒸馏水进行淋洗,再用乙醇水溶液进行梯度洗脱,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.16~0.45的馏分;其中,乙醇水溶液的梯度范围为体积浓度30%~90%。7.如权利要求1所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:步骤(2)中还包含下列步骤:将大孔树脂分离得到的馏分浓缩,依次用二氯甲烷和正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,干燥,即可。8.如权利要求1所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:所述的制备方法还包含步骤(3):将步骤(2)所得的物质进行硅胶柱层析分离,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.44,Rf值为0.27和Rf值为0.16的三个馏分中的一个或多个馏分。9.如权利要求8所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,在所述的硅胶柱层析分离中,上柱物质与硅胶的质量比为2∶100;硅胶的目数为100目~300目;所述硅胶柱层析的步骤为:用二氯甲烷、甲醇和水的混合溶剂进行梯度洗脱,梯度为二氯甲烷、甲醇和水的体积比为20∶3∶1→15∶3∶1→10∶3∶1→6∶4∶1;每个梯度所用的混合溶剂的用量为150~250ml,以8ml分段收集各馏分,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.44,Rf值为0.27和Rf值为0.16的三个馏分中的一个或多个馏分。10.如权利要求8所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:步骤(3)中还包含下列步骤:将各馏分的溶液浓缩,干燥,即可。11.如权利要求1所述的武夷山岩茶提取物的制备方法,其特征在于:所述的武夷山岩茶提取物的制备方法包含下列步骤:以武夷山岩茶为原料,粉碎至20~100目,以1g∶5ml~10ml的料液比,加入体积浓度为50%~70%的乙醇水溶液,40~70℃旋转提取1~3小时,过滤,收集滤液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,滤液过D101型大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水淋洗,再以体积浓度为30%~90%的乙醇水溶液依次梯度洗脱,分别收集洗脱液,每馏分为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同馏分,取第11~25馏分,即收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.16~0.45的馏分,浓缩,依次用二氯甲烷和正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,粉末提取物通过硅胶柱层析分离,依次用体积比例20∶3∶1→15∶3∶1→10∶3∶1→6∶4∶1的二氯甲烷、甲醇和水的混合洗脱剂进行梯度洗脱,每个梯度所用的混合溶剂为150ml~250ml,分别收集洗脱液,每馏分8ml,以硅胶薄层层析法检测,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,合并Rf值为0.44的7-18馏分,其为DF-3组;合并Rf值为0.27的馏分19-39馏分,其为DF-2组;合并Rf值为0.16的45-81馏分,其为DF-1组,将各馏分浓缩,真空干燥,得干燥粉末,即可。12.如权利要求1~11任一项所述的制备方法制得的武夷山岩茶提取物。13.如权利要求12所述的武夷山岩茶提取物在制备清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶、抑制乙酰胆碱酯酶或抑制酪氨酸酶的食品、饮品、保健食品、药物或化妆品中的应用。14.如权利要求12所述的武夷山岩茶提取物在制备具有抗氧化、抗衰老、降血糖、改善记忆和美白中的一种或多种功能的食品、饮品、保健食品、药物或化妆品中的应用。

说明书



技术领域

太阳城集团本发明具体的涉及一种武夷山岩茶提取物及其制备方法和应用。

背景技术

太阳城集团武夷山岩茶(Wuyi Mountain Rock Tea)历史悠久,早在二世纪初即开始种植,武夷山岩茶(Wuyi Mountain Rock Tea)具有绿茶之清香,红茶之甘醇,以武夷山岩茶为原料制成的名茶是茶中之极品,其品种很多,如大红袍、乌龙茶、铁观音、白鸡冠、水金龟等名茶。以“大红袍”(camellia.sinensiscv.dahongpao)最为名贵,享“茶中之王”之誉。大红袍生长在武夷山风景区内九龙窠的半山崖上,那里群山环抱,重峦叠嶂,幽涧清水长流,常年云雾弥漫。武夷山地属“丹霞地形”,由砂、砾凝结而成,土质疏松、土壤呈酸性(PH值为4-6),两旁岩壁矗立,日照不长,温度适宜,终年有涓涓细泉滋润茶树,由枯叶、苔醉等植物腐烂形成的有机物,使土地肥沃而无污染。由于生长环境得天独厚,武夷山岩茶(Wuyi Mountain Rock Tea)成茶具有独到的品质和品味,其滋味醇厚,饮后回甘快、余味长,香气不论高低都持久浓厚,茶冷仍幽香飘逸,且其含有多种化学元素,药理性质特别显著。

“大红袍”作为“茶中之王”,目前市场上常见的有价格昂贵的不同包装等级的原茶产品,但是太阳城集团其进一步深加工、功效成分的提取分离、提取物在保健品、饮品、食品、医药、化妆品等方面的应用还尚未见报道。另外,在加工包装“大红袍”等原茶产品过程中,一部分老叶子、残次叶常被作为废弃叶剔除,而这些残次叶、老叶中也含有一定量的功效成分如茶多酚黄酮等,将其弃之,造成了很大的浪费。

太阳城集团因此,利用武夷山岩茶“大红袍”等的下脚料对其功效成分茶多酚进行提取分离,并对其功效性进行进一步的研究,开发食用方便、功效性更好的岩茶提取物保健品(如茶饮料)等将具有广阔的市场前景,且充分利用了武夷岩茶原料,减少浪费,提高经济效益。

太阳城集团茶多酚是茶之“灵魂”,研究证明,茶多酚可以清除活性氧自由基、抗氧化、抗衰老、降血压、降血脂、防辐射、防癌治癌等作用,是一类安全、无毒、多功能的天然抗氧化剂。

太阳城集团但是,茶多酚的主要成分儿茶素的性质非常活泼,在空气和酸性条件下很容易被氧化,导致其抗氧化能力降低。而且从结构看,其既有疏水性的苯环,又有亲水性的羟基,所以该分子既有亲水性又有亲脂性,但是其在水相和油相中的溶解度都不高,导致其生物活性得不到充分的发挥,影响其在食品、医药等领域的应用。

太阳城集团但是,至今尚未见从天然植物岩茶,如“大红袍”乌龙茶等中直接提取分离含有糖苷的茶多酚。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供了一种与现有的茶叶提取物完全不同的武夷山岩茶提取物,本发明的武夷山岩茶提取物性质稳定、水溶性好,并且与现有的茶多酚苷元相比,性质更稳定,活性更高。

太阳城集团本发明中,所述的武夷山岩茶提取物(WTDF)的原料为武夷岩茶,包括武夷山大红袍、乌龙茶、铁观音、白鸡冠、水金龟等名茶;还有以茶树生长环境命名的,如不见天、金钥匙等;以茶树形状命名的,如醉海棠、醉洞宾、钓金龟、凤尾草、玉麒麟、一枝香等;有以茶叶树形命名的,如瓜子树、金钱、竹丝、金柳条、倒叶柳等;以茶树发芽迟早命名的,如迎春柳,不知春等;以茶香型命名的,如肉桂、石乳香、白麝香等。

因此本发明涉及一种武夷山岩茶提取物(WTDF)的制备方法,其包含下列步骤:

(1)将武夷山岩茶用乙醇水溶液提取;

(2)将步骤(1)提取所得物质用大孔树脂柱进行分离,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.16~0.45的馏分;即可。

其中,所述的武夷山岩茶较佳的为武夷山大红袍、乌龙茶、铁观音、白鸡冠、水金龟、不见天、金钥匙、醉海棠、醉洞宾、钓金龟、凤尾草、玉麒麟、一枝香、瓜子树、金钱、竹丝、金柳条、倒叶柳、迎春柳、不知春、肉桂、石乳香和白麝香中的一种或多种,优选武夷山大红袍。

步骤(1)中,所述的武夷山岩茶可以是武夷山岩茶的下脚料,其较佳的为粉碎后使用,粉碎后的粒径较佳的为20~100目;所述的乙醇水溶液的体积浓度较佳的为30%~90%,更佳的为50%~70%,武夷山岩茶与乙醇水溶液的料液比较佳的为1g∶5ml~1g∶10ml;所述的提取的温度较佳的为40~70℃,提取的方法较佳的为旋转提取,提取太阳城集团较佳的为1~3小时。

步骤(1)中,较佳的还包含下列步骤:将提取所得的提取液过滤,收集滤液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,得滤液,即可。

太阳城集团步骤(2)中,所述的大孔树脂较佳的为D101和/或D201大孔树脂,上柱原料的重量与大孔树脂的重量比较佳的为1∶1.5~1∶1。

大孔树脂分离的步骤较佳的为:先用蒸馏水进行淋洗,再用乙醇水溶液进行梯度洗脱,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.16~0.45的馏分;其中,乙醇水溶液的梯度范围较佳的为体积浓度30%~90%,更佳的为50%~70%。

步骤(2)中,较佳的还包含下列步骤:将大孔树脂分离得到的馏分浓缩,依次用二氯甲烷和正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,干燥,即可。

本发明中,所述的武夷山岩茶提取物(WTDF)的制备方法较佳的还包含下列步骤(3):将上述步骤(2)所得的物质进行硅胶柱层析分离,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.44,Rf值为0.27和Rf值为0.16的三个馏分中的一个或多个馏分。

太阳城集团其中,在所述的硅胶柱层析分离中,上柱物质与硅胶的质量比较佳的为2∶100;硅胶的目数较佳的为100目~300目;所述硅胶柱层析的步骤较佳的为用二氯甲烷、甲醇和水的混合溶剂进行梯度洗脱,梯度较佳的为二氯甲烷、甲醇和水的体积比为20∶3∶1→15∶3∶1→10∶3∶1→6∶4∶1;每个梯度所用的混合溶剂的用量较佳的为150~250ml,以8ml分段收集各馏分,收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.44,Rf值为0.27和Rf值为0.16的三个馏分中的一个或多个馏分。

步骤(3)中,较佳的还包含下列步骤:将各馏分的溶液浓缩,干燥,即可。

最佳的,所述的武夷山岩茶提取物的制备方法包含下列步骤:以武夷山岩茶为原料,粉碎至20~100目,以1∶5~10(g/ml)的料液比,加入体积浓度为50%~70%的乙醇水溶液,40~70℃旋转提取1~3小时,过滤,收集滤液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,滤液过D101型大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水淋洗,再以体积浓度为30%~90%的乙醇水溶液依次梯度洗脱,分别收集洗脱液,每馏分为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同馏分,取第11~25馏分,即收集用硅胶薄层层析法检测时,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,Rf值为0.16~0.45的馏分,浓缩,依次用二氯甲烷和正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,粉末提取物通过硅胶柱层析分离,依次用体积比例20∶3∶1→15∶3∶1→10∶3∶1→6∶4∶1的二氯甲烷、甲醇和水的混合洗脱剂进行梯度洗脱,每个梯度所用的混合溶剂为150ml~250ml,分别收集洗脱液,每馏分8ml,以硅胶薄层层析法检测,展开剂二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1,合并Rf值为0.44的7-18馏分,其为DF-3组;合并Rf值为0.27的馏分19-39馏分,其为DF-2组;合并Rf值为0.16的45-81馏分,其为DF-1组,将各馏分浓缩,真空干燥,得干燥粉末,即可。

太阳城集团上述制备方法中的各优选条件可按本领域知识进行任意组合,即得本发明的各优选实例。

本发明进一步涉及由上述制备方法制得的武夷山岩茶提取物。

本发明还涉及上述武夷岩茶提取物在制备清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶、抑制乙酰胆碱酯酶或抑制酪氨酸酶等的食品、饮品、保健食品、药物或化妆品中的应用。

本发明还涉及上述武夷岩茶提取物在制备具有抗氧化、抗衰老、降血糖、改善记忆和美白中的一种或多种功能的食品、饮品、保健食品、药物或化妆品中的应用。

本发明中,通过以下方法对优选的武夷岩茶的提取物结构进行鉴定,结果如下:

太阳城集团1.DF-1提取物的红外光谱分析

太阳城集团(1)糖类物质O-H键伸缩振动

太阳城集团糖类物质的O-H键伸缩振动在3800~3200cm-区为有许多小肩峰组成的强宽峰,这是由于分子中的羟基形成多种方式的氢键所致。多糖类化合物如纤维素二聚体的羟基峰在3400cm-附近,多聚体的羟基峰在3347~3324cm-。

太阳城集团样品在3353.7cm-处有强而宽的峰,推断可能为糖类物质的O-H键伸缩振动。

太阳城集团(2)糖类物质C-O伸缩振动

糖类物质在1200~1030cm-C-O伸缩振动产生的吸收带。

样品在1145.5cm-、1080cm-、1035.6cm-处有三个吸收峰,推断该多聚体为糖苷类物质。

(3)糖苷类型解析

吡喃糖苷在1100~1010cm-出现3个强峰,而呋喃糖则出现2个强峰。

样品在1090cm-、1035.5cm-、1010cm-出现3个吸收峰,提示该糖苷为吡喃糖苷。而对照品(绿茶多酚)则在1100~1010cm-出现6个峰,提示该对照品没有吡喃糖苷。

(4)吡喃糖α和β异构体的解析

太阳城集团吡喃糖为α异构体在766±10cm-有吡喃环扩张运动特征峰,在844±8cm-有C1-H弯曲振动特征峰。

样品在767.5cm-和850cm-有吸收峰,判断该吡喃糖为α异构体。

太阳城集团2.DF-1提取物的旋光度的测定

样品的比旋光度而对照品的比旋光度两者的差值为52.5°,推断本样品是含葡萄糖配基的糖苷物质,因为葡萄糖的比旋光度配基葡萄糖与苷元产生消旋作用使糖苷物质的旋光度发生改变,即左旋204.6°与右旋52.5°产生消旋作用使糖苷物质的旋光度变为左旋150.6°。

3.DF-1、DF-2和DF-3提取物的硅胶薄层层析

太阳城集团通过对各样品进行水解,以葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、岩藻糖、半乳糖、葡萄糖醛酸为标准单糖,将样品和标准糖进行硅胶薄层层析分析,结果表明,本样品中含有葡萄糖。

4.DF-1、DF-2和DF-3的液相-质谱分析

太阳城集团(1)EGCG糖苷(代号DF-1)

质谱中有459和623正离子峰,EGCG的质量数为458,EGCG的分子上连接一个葡萄糖,其质量数为458+180-18=620,证明样品中含有EGCG茶多酚糖苷类物质。

(2)ECG糖苷(代号DF-2)

质谱中有441负离子峰和605负离子峰,ECG的质量数为442,ECG的分子上连接一个葡萄糖,其质量数为442+180-18=604,证明样品中含有ECG茶多酚糖苷类物质。

(3)EGC糖苷(代号DF-3)

质谱中有305负离子峰和630负离子峰,EGC的质量数为306,EGC的分子上连接上两个葡萄糖,306+180-18+180-18=630,证明样品中含有EGC糖甙类物质。

除特殊说明外,本发明涉及的原料和试剂均市售可得。

太阳城集团本发明的积极进步效果在于:

太阳城集团(1)本发明可以利用武夷山岩茶如大红袍等以及其残次品来提取活性功效成分,即武夷岩茶提取物(WTDF),充分利用了宝贵的武夷岩茶资源。

(2)本发明的武夷山岩茶如大红袍等的提取物(WTDF)中含有茶多酚儿茶素与糖基相结合的糖苷,与现有的茶多酚提取物相比,其活性、稳定性和水溶性大大提高。并且,本发明的岩茶提取物与从绿茶和白茶中提取的茶多酚苷元的活性相比,要高出30%~50%。

太阳城集团(3)本发明的武夷山岩茶如大红袍等的提取物(WTDF)为开发高效的具有抗氧化、降血糖、改善记忆力的食品、饮品、保健品、药品和具有美白功效的化妆品提供了新的途径。

具体实施方式

下面用实施例来进一步说明本发明,但本发明并不受其限制。

以下涉及到Rf值的实施例中,Rf值的测定条件均为:展开剂系统为二氯甲烷∶甲醇∶水的体积比为8∶3∶1。

实施例1

太阳城集团称取岩茶大红袍1000g,粉碎,20~100目,加入体积浓度为80%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋转提取2h,过滤得到提取液,滤渣继续用6000ml体积浓度为80%的乙醇水溶液,65℃旋转提取2h,过滤,合并两次提取液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,取滤液过大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水3000ml淋洗,再以体积浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脱,分别收集洗脱液,每流份为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值为0.16~0.45,浓缩至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,经鉴定,所得活性物质有一部分多酚糖苷,含量在20%左右。

实施例2

称取岩茶大红袍1000g,粉碎,20~100目,加入体积浓度为70%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋转提取2h,过滤得到提取液,滤渣继续用6000ml体积浓度为70%的乙醇水溶液,65℃旋转提取2h,过滤,合并两次提取液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,取滤液过大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水3000ml淋洗,再以体积浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脱,分别收集洗脱液,每流份为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值为0.16~0.45,浓缩至一定的量,依此用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,经鉴定,所得活性物质中多酚糖苷的含量为50%左右。

实施例3

称取岩茶大红袍1000g,粉碎,20~100目,加入体积浓度为50%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋转提取2h,过滤得到提取液,滤渣继续用6000ml体积浓度为50%的乙醇水溶液,65℃旋转提取2h,过滤,合并两次提取液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,取滤液过大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水3000ml淋洗,再以体积浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脱,分别收集洗脱液,每流份为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值为0.16~0.45,浓缩至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,经鉴定,所得活性物质中多酚糖苷的含量为50%左右。

实施例4

太阳城集团称取岩茶大红袍1000g,粉碎,20~100目,加入体积浓度为30%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋转提取2h,过滤得到提取液,滤渣继续用6000ml体积浓度为30%的乙醇水溶液,65℃旋转提取2h,过滤,合并两次提取液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,取滤液过大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水3000ml淋洗,再以体积浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脱,分别收集洗脱液,每流份为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值为0.16~0.45,浓缩至一定的量,依此用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,经鉴定,所得活性物质中多酚糖苷的含量为低于20%。

实施例5

太阳城集团称取岩茶大红袍1000g,粉碎,20~100目,加入体积浓度为80%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋转提取2h,过滤得到提取液,滤渣继续用6000ml体积浓度为80%的乙醇水溶液,65℃旋转提取2h,过滤,合并两次提取液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,取滤液过大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水3000ml淋洗,再以体积浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脱,分别收集洗脱液,每流份为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值为0.16~0.45,浓缩至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物。经鉴定,所得活性物质有一部分糖苷,含量在20%左右。将正丁醇萃取物进行硅胶柱层析分离,以二氯甲烷、甲醇和水的体积比为20∶3∶1,15∶3∶1,10∶3∶1,6∶4∶1梯度150ml~250ml依次洗脱,分段收集各馏分,根据薄层层析结果,合并馏分7-18,Rf值为0.44;合并19-39馏分,Rf值为0.27;合并45-81的馏分,Rf值为0.16。将各馏分浓缩,真空干燥,得干燥粉末。

实施例6

太阳城集团称取岩茶大红袍1000g,粉碎,20~100目,加入体积浓度为70%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋转提取2h,过滤得到提取液,滤渣继续用6000ml体积浓度为70%的乙醇水溶液,65℃旋转提取2h,过滤,合并两次提取液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,取滤液过大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水3000ml淋洗,再以体积浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脱,分别收集洗脱液,每流份为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值为0.16~0.45,浓缩至一定的量,依此用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,经鉴定,所得活性物质中糖苷的含量为50%左右。将正丁醇萃取物进行硅胶柱层析分离,以二氯甲烷、甲醇和水的体积比为20∶3∶1,15∶3∶1,10∶3∶1,6∶4∶1梯度150ml~250ml依次洗脱,分段收集各馏分,根据薄层层析结果,合并馏分7-18,Rf值为0.44;合并19-39馏分,Rf值为0.27;合并45-81的馏分,Rf值为0.16。将各馏分浓缩,真空干燥,得干燥粉末。

实施例7

太阳城集团称取岩茶大红袍1000g,粉碎,20~100目,加入体积浓度为50%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋转提取2h,过滤得到提取液,滤渣继续用6000ml体积浓度为50%的乙醇水溶液,65℃旋转提取2h,过滤,合并两次提取液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,取滤液过大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水3000ml淋洗,再以体积浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脱,分别收集洗脱液,每流份为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值为0.16~0.45,浓缩至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,经鉴定,所得活性物质中糖苷的含量为50%左右。将正丁醇萃取物进行硅胶柱层析分离,以二氯甲烷、甲醇和水的体积比为20∶3∶1,15∶3∶1,10∶3∶1,6∶4∶1梯度150ml~250ml依次洗脱,分段收集各馏分,根据薄层层析结果,合并馏分7-18,Rf值为0.44;合并19-39馏分,Rf值为0.27;合并45-81的馏分,Rf值为0.16。将各馏分浓缩,真空干燥,得干燥粉末。

实施例8

太阳城集团称取岩茶大红袍1000g,粉碎,20~100目,加入体积浓度为30%的乙醇水溶液6000ml,65℃旋转提取2h,过滤得到提取液,滤渣继续用6000ml体积浓度为30%的乙醇水溶液,65℃旋转提取2h,过滤,合并两次提取液,脱色,过滤,滤液浓缩至无乙醇,离心,过滤,取滤液过大孔吸附树脂柱,先以蒸馏水3000ml淋洗,再以体积浓度为30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各2500ml依次洗脱,分别收集洗脱液,每流份为150ml,分别做硅胶薄层层析分析,合并相同流份,取第11~25流份,其Rf值为0.16~0.45,浓缩至一定的量,依次用二氯甲烷、正丁醇萃取,取正丁醇相,浓缩,真空干燥,得到干燥的粉状提取物,经鉴定,所得活性物质中糖苷的含量为低于20%。将正丁醇萃取物进行硅胶柱层析分离,以二氯甲烷、甲醇和水的体积比为20∶3∶1,15∶3∶1,10∶3∶1,6∶4∶1梯度150ml~250ml依次洗脱,分段收集各馏分,根据薄层层析结果,合并馏分7-18,Rf值为0.44;合并19-39馏分,Rf值为0.27;合并45-81的馏分,Rf值为0.16。将各馏分浓缩,真空干燥,得干燥粉末。

效果实施例

本发明的武夷岩茶提取物具有抗氧化、降血糖、改善记忆力和美白的功效,以下通过DPPH自由基清除率试验、α-葡萄糖苷酶活性抑制率试验、乙酰胆碱酯酶活性抑制率试验和酪氨酸酶活性抑制率试验,说明本发明提取物的功效性。

太阳城集团采用分光光度法测定提取物清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶活性和乙酰胆碱酯酶活性的功效,并与商品绿茶和白茶所得茶多酚提取物进行功效对比,结果见表1:

表1  功效评价试验结果

太阳城集团表2  本发明的提取物DF-1、DF-2和DF-3的活性检测数据

综上所述:

太阳城集团(1)本发明的武夷山岩茶提取物具有清除DPPH自由基、抑制α-葡萄糖苷酶活性、乙酰胆碱酯酶活性和酪氨酸酶活性的作用,且其功效性显著优于绿茶提取物茶多酚的功效性。因此,本提取物为开发具有降血糖、醒脑与改善记忆力、预防老年痴呆症功效的食品、饮品、保健品、药品提供了新的天然原料,具有广阔的市场前景。

(2)本发明的武夷山岩茶提取物具有清除DPPH自由基和抑制酪氨酸酶的功效,且其功效性显著优于茶多酚苷元类物质的功效性。因此,本提取物可作为天然植物功效原料,用于具有抗氧化、抗衰老、美白功效的高级化妆品。

(3)本发明的武夷山岩茶提取物改善了茶多酚苷元类物质易氧化、不稳定的缺陷,使提取物的稳定性有了极大的提高,从而提高了提取物的活性功效。

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