太阳城集团

  • / 11
  • 下载费用:30 金币  

具有抗氧化性滑菇黏液的提取方法及其应用.pdf

关 键 词:
具有 氧化 性滑菇 黏液 提取 方法 及其 应用
  专利查询网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
摘要
申请专利号:

CN201710056960.3

申请日:

20170120

公开号:

CN106805236A

公开日:

20170609

当前法律状态:

有效性:

审查中

法律详情:
IPC分类号: A23L33/10,A23L31/00 主分类号: A23L33/10,A23L31/00
申请人: 大连民族大学
发明人: 冮洁,姜冰雪,崔琳
地址: 116600 辽宁省大连市经济技术开发区辽河西路18号
优先权: CN201710056960A
专利代理机构: 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 代理人: 胡景波
PDF完整版下载: PDF下载
法律状态
申请(专利)号:

CN201710056960.3

授权太阳城集团号:

法律状态太阳城集团日:

法律状态类型:

摘要

本发明涉及一种具有抗氧化性滑菇黏液的提取方法及其应用。滑菇黏液的提取方法为:将新鲜滑菇菌根剪除,将滑菇子实体于25~27℃水中摇洗2~3h,滑菇子实体与水料液比为1:1~1:3(g/ml),过滤后收集滤液,重复2~4次相同操作合并滤液,过滤除杂,得到滑菇黏液。将滑菇黏液经旋转蒸发真空浓缩4‑5倍后倒入浅盘中,于45~60℃烘箱中热风干燥至恒重,得到滑菇黏液干物质,将滑菇黏液干物质作为有效成分制备抗氧化剂。采用本发明方法简单易操作,成本低,制备的抗氧化剂绿色、无污染、抗氧化活性高。本发明拓宽了滑菇黏液的应用领域,充分利用了滑菇黏液,将其作为抗氧化剂的原料,可以替代现有的化学抗氧化剂,弥补现有技术的不足,为抗氧化剂领域提供新思路。

权利要求书

1.具有抗氧化性滑菇黏液的提取方法,其特征在于,滑菇黏液的提取方法为:将新鲜滑菇菌根剪除,将滑菇子实体于25~27℃水中摇洗2~3h,滑菇子实体与水料液比为1:1~1:3(g/ml),过滤后收集滤液,重复2~4次相同操作合并滤液,过滤除杂,得到滑菇黏液。2.根据权利要求1所述的具有抗氧化性滑菇黏液的提取方法,其特征在于,摇洗条件为:温度25℃摇洗2h。3.根据权利要求1所述的具有抗氧化性滑菇黏液的提取方法,其特征在于,滑菇子实体与水料液比为1:1(g/ml)。4.如权利要求1所述滑菇黏液在抗氧化剂中的应用,其特征在于,将滑菇黏液经旋转蒸发气真空浓缩4-5倍后倒入浅盘中,于45~60℃烘箱中热风干燥至恒重,得到滑菇黏液干物质,将滑菇黏液干物质作为有效成分制备抗氧化剂。

说明书

技术领域

太阳城集团本发明属于食品加工领域,具体涉及一种具有抗氧化性滑菇黏液的提取方法及应用。

背景技术

太阳城集团滑菇学名光帽鳞伞(Pholiota nameko)。由于其菌盖表面有一层黏液,食用时黏滑可口而得名。滑菇不仅味道鲜美,营养丰富,而且具有较高的医疗价值。我国已成为世界上滑菇产量最大的国家,主产区集中在河北北部、辽宁、黑龙江等地。在我国台湾省,因滑菇伞形小,半球形,果团块,像一串珍珠做成的珠宝,也被称为“珍珠蘑”或“真珠菇”。

滑菇鲜菇含水分约为93%。每100g滑菇干菇中含粗蛋白33.76g,纯蛋白15.13g,脂肪4.05g,总糖38.89g(其中加水生成还原糖32.24g,戊聚糖2.77g,甲基戊聚糖0.94g,海藻糖3.67g,甘露糖3.20g),纤维14.23g,灰分8.99g。灰分中含有钾、磷、铁、钙等多种矿质元素。此外,每100g滑菇含有维生素B20.05mg,维生素C 8.83mg,维生素D 0.22g,滑菇具有很高的营养价值,是一种低热量、低脂肪的保健食品。

新鲜滑菇表面含有大量黏液,从滑菇黏液的功能看,滑菇黏液可以通过提高胸腺指数、脾指数和脾淋巴细胞转化率增强机体免疫力,发挥抗衰老作用。工业中常常采用水洗、杀青、冷却、盐渍的方法处理滑菇,以延长保存期,并且方便食用,此过程会产生大量的含滑菇粘液的废水,一般作为废液扔掉,不但污染环境,还造成滑菇营养物质的大量损失,导致浪费。

发明内容

为了对滑菇黏液进行充分利用,避免浪费,减少环境污染,本发明提供一种具有抗氧化性的滑菇黏液的提取方法及其应用。

本发明第一个目的是请求保护具有抗氧化性滑菇黏液的提取方法,滑菇黏液的提取方法为:

将新鲜滑菇菌根剪除,将滑菇子实体于25~27℃水中摇洗2~3h,滑菇子实体与水料液比为1:1~1:3(g/ml),过滤后收集滤液,重复2~4次相同操作合并滤液,过滤除杂,得到滑菇黏液。

优选的,摇洗条件为:温度25℃摇洗2h。

太阳城集团优选的,滑菇子实体与水料液比为1:1(g/ml)。

太阳城集团本发明另一个目的请求保护上述滑菇黏液的应用,方法为:将滑菇黏液经旋转蒸发气真空浓缩4-5倍后倒入浅盘中,于45~60℃烘箱中热风干燥至恒重,得到滑菇黏液干物质,将滑菇黏液干物质作为有效成分制备抗氧化剂。

与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明滑菇黏液提取方法简单易操作,成本低,适合大规模生产、利于工业化。该方法得到的滑菇黏液抗氧化性强,制备的抗氧化剂绿色、无污染、抗氧化活性高,可以替代现有的化学抗氧化剂。本发明拓宽了滑菇黏液的应用领域,提高滑菇黏液利用率,变废为宝将其作为抗氧化剂的原料,弥补现有技术的不足,为抗氧化剂领域提供新思路。

附图说明

图1蛋白质标准曲线;

太阳城集团图2黏液中DNA琼脂凝胶电泳;

图3磷标准曲线;

图4葡萄糖标准曲线;

图5滑菇黏液的抗氧化性曲线。

具体实施方式

太阳城集团下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步的说明,但本发明不以任何形式受限于实施例内容。实施例中所述试验方法如无特殊说明,均为常规方法;如无特殊说明,所述试剂和生物材料,均可从商业途径获得。

实施例1

滑菇黏液的提取:

太阳城集团将新鲜滑菇菌根剪除,称取滑菇子实体3份各200g,分别编号为1、2、3号。每份用200mL水于25℃下摇洗2h,过滤后收集滤液。再将滑菇子实体用200mL水于25℃下摇洗2h,过滤。再用100mL水同条件下摇洗,分别合并三次过滤后的滤液。用六层纱布过滤除杂三次,制成滑菇黏液。4℃冰箱保存。

表1 黏液的提取数据汇总表

太阳城集团实验结果表明,200g新鲜滑菇,共加500ml水,25℃下进行摇洗。最终获得黏液量的平均值为315ml,黏液的平均得率为63%。滑菇黏液pH平均值为5.42,呈弱酸性。滑菇含水量为95.23%,黏液的干物质含量为2.25mg/mL。

实施例2

滑菇黏液定性分析

(1)蛋白质定性试验

太阳城集团采用Bradford法测蛋白含量。用双缩脲法检测蛋白的存在。蛋白质含有多个肽键,在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的络合物。其颜色的深浅与被测样品中蛋白质浓度呈正比,而与蛋白质分子量和氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。

太阳城集团取两支试管,分别加入1%的标准蛋白溶液1mL和黏液1mL。再各加入10%NaOH溶液2mL,摇匀,再加入1%的硫酸铜溶液2滴,边加边摇,观察溶液颜色的变化。

太阳城集团表2 标准蛋白测得的吸光值

太阳城集团表3 滑菇黏液蛋白质含量测定的结果

实验结果表明,滑菇黏液中蛋白浓度为15.41μg/mL,蛋白含量为0.685%。

(2)核酸定性试验

太阳城集团采用定磷法测核算含量。使用DNA提取试剂盒对滑菇黏液中的DNA进行提取和纯化,然后用1%的琼脂凝胶电泳检测。

如图2所示。实验结果表明,图中出现两条亮带,说明滑菇黏液中有DNA的存在。

表4 滑菇黏液核酸含量的测定

太阳城集团DNA浓度计算公式:有机磷含量/测定时取样毫升数×稀释倍数/9.9% (1)

实验结果表明,滑菇黏液中DNA浓度为27.38μg/mL,核酸含量为1.217%。

(3)多糖定性试验

采用FehLing法。取两支试管,分别加入1%的葡萄糖溶液1mL、黏液1mL,再各加入FehLing试剂(0.1g/ml NaOH和0.05g/ml CuSO4混合,现用现配)2mL、浓硫酸1滴。沸水浴中加热5min,取出、冷却,观察颜色变化。

太阳城集团表5 滑菇黏液多糖含量测定的数据汇总

太阳城集团实验结果表明,黏液中多糖浓度为0.512mg/mL,多糖纯度为74.50%,多糖含量为22.76%

太阳城集团200g新鲜滑菇用500mL水进行摇洗,得到黏液量的平均值为315mL,黏液的得率为63%。即1g新鲜滑菇,可获得的黏液量为1.575mL,其中黏液多糖为0.891mg,核酸为43.12μg,蛋白质为24.27μg。由于滑菇的含水量为95.23%,所以1g鲜滑菇的干重为0.0477g。以滑菇的干重进行换算,可得每1g滑菇干菇中含有黏液多糖18.679mg,核酸0.904mg,蛋白质0.508mg。

实施例3

抗氧化性能测试

太阳城集团滑菇黏液对·OH的清除作用

取六支10mL刻度管,均依次加入1mL的Tris-HCL溶液(pH8.20),0.3mL硫酸亚铁铵(5mmol/L)和0.3mL的邻二氮菲溶液(7.5mmol/L),1号和2号试管不加样品,3到6号试管中分别加入0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL的黏液,1号试管不加入H2O2(7.5mmol/L),2到6号试管加入H2O2。定容至10mL。在37℃的水浴锅中反应1h,用Tris-HCL溶液调零,在510nm下测吸光度A,计算对·OH的清除率。

太阳城集团表6 黏液清除羟自由基活性试验加样表

·OH清除率计算公式为:

太阳城集团式(2)中,A1为体系不加H2O2和黏液的吸光值;A2为体系加H2O2而不加黏液以后的吸光值;A3为体系加入H2O2和黏液后的吸光值。

表7 滑菇黏液对·OH的清除率

太阳城集团当清除率达到50%时,加入黏液的体积为1.45mL,其中含有0.82mg的多糖,22.34μg的蛋白质和39.70μg的核酸。

太阳城集团滑菇黏液对O2-·的清除作用

取5支10mL刻度管,各加入0.05mol/L Tris-HCL缓冲液4.5mL,置于25℃水浴中预热25min,1到4号分别加入0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL黏液并用水补足到2.0mL。5号试管中加入2mL水。每支试管各加入0.4mL邻苯三酚溶液(0.5mmol/L),混匀后于25℃水浴中反应4min,加入HCL(8mol/L)2滴终止反应。以Tris-HCL缓冲液调零,于320nm处测定吸光度,空白对照组以相同体积的水代替。

表8 清除超氧阴离子活性试验加样表

太阳城集团超氧阴离子清除率计算公式为:

太阳城集团O2-·清除率(%)=(Ao-Ai)÷Ao×100% (3)

式(3)中,Ao为体系未加多糖溶液(黏液)的吸光值;Ai为体系加入多糖溶液(黏液)的吸光值。

太阳城集团表9 滑菇黏液对超氧阴离子的清除率

太阳城集团通过计算可得,当清除率达到50%时,加入黏液的体积为1.22mL,其中含有0.69mg的多糖,18.80μg的蛋白质和33.40μg的核酸。与同组实验所测得的滑菇黏液多糖和Vc抗氧活性的结果相比,当清除率达到50%时,多糖浓度为0.72mg/mL,Vc浓度为0.43mg/mL。测定时所加的体积为1mL,滑菇黏液具有较强的抗氧化能力,并且其主要作用的物质是多糖。

滑菇黏液对DPPH自由基的清除作用

取9个试管,1号为空白试管,加入2mL无水乙醇和2mLDPPH溶液。2到5号试管分别加入2mL DPPH溶液,6到9号试管分别加入2mL的无水乙醇。2到5号试管分别加入0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL的黏液,并用水补足至2.0mL6到9号试管分别加入0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL的黏液,并用水补足至2.0mL。反应0.5h后在517nm处测吸光值Ai。

表10 清除DPPH自由基活性试验加样表

DPPH自由基清除率计算公式为:

DPPH自由基清除率(%)=[1-(Ai-Aj)]÷Ac×100% (4)

式(4)中,Ai为体系加入DPPH和滑菇黏液的吸光值;Aj为体系加入多糖溶液而未加DPPH的吸光值;Ac为体系不加入滑菇黏液的吸光值。

表11 滑菇黏液对DPPH的清除率

通过计算可得,当清除率达到50%时,加入黏液的体积为1.21mL,其中含有0.68mg的多糖,18.65μg的蛋白质和33.13μg的核酸。与同组实验所测得的滑菇黏液多糖和Vc抗氧活性的结果相比,当清除率达到50%时,多糖浓度为0.78mg/mL,Vc浓度为0.44mg/mL。测定时所加的体积为1mL,滑菇黏液具有较强的抗氧化能力,并且其主要作用的物质是多糖。

太阳城集团将滑菇黏液对·OH、O2-·、和DPPH的清除率进行对比,如图5所示,可以看出,滑菇黏液对DPPH的清除作用较强,并且在黏液体积为1mL以前,对O2-·清除率增加的速率相对较快,在黏液体积为1mL以后,滑菇黏液对DPPH清除率增加的速率相对较快。

太阳城集团实施例4 制备抗氧化剂

太阳城集团本发明实施例1制备的滑菇黏液可以直接作为抗氧化剂原料制备抗氧化剂,也可以作为辅料用于制备抗氧化剂。制备抗氧化剂的方法可以采用本领域常用的包衣片剂的生产方法。制备抗氧化剂时,先将滑菇黏液经旋转蒸发气真空浓缩5倍后倒入浅盘中,于45℃烘箱中热风干燥至恒重,得到滑菇黏液干物质。将滑菇黏液干物质与配料(茶多酚、微晶纤维素)混合均匀,经粉末直压、素片、包薄膜衣片制成包衣片剂。

太阳城集团本文
本文标题:具有抗氧化性滑菇黏液的提取方法及其应用.pdf
链接地址:http://zh228.com/p-6708576.html
太阳城集团我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - - 联系我们

copyright@ 2017-2018 zhuanlichaxun.net网站版权所有
经营许可证编号:粤ICP备17046363号-1 
 


收起
展开
葡京赌场|welcome document.write ('');