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一种红心猕猴桃继代培养基及其制备方法.pdf

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一种 红心 猕猴桃 培养基 及其 制备 方法
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摘要
申请专利号:

CN201711451030.4

申请日:

20171227

公开号:

CN108029556A

公开日:

20180515

当前法律状态:

有效性:

审查中

法律详情:
IPC分类号: A01H4/00 主分类号: A01H4/00
申请人: 康美药业(文山)药材种植管理有限公司
发明人: 许冬瑾,严新
地址: 663099 云南省文山壮族苗族自治州文山市开化南路文山中国中药生物谷4-21
优先权: CN201711451030A
专利代理机构: 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 代理人: 邵穗娟;汤喜友
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法律状态
申请(专利)号:

太阳城集团CN201711451030.4

授权太阳城集团号:

法律状态太阳城集团日:

法律状态类型:

摘要

本发明公开了一种红心猕猴桃继代培养基,包括以下浓度的以下组分:20‑30mL/L的稀释10倍的大量元素母液、5‑10mL/L的稀释100倍的微量元素母液、5‑10mL/L的铁盐母液、5‑10mL/L的稀释50倍的有机物母液、0.1‑0.2g/L的肌醇、3.5‑4.8g/L的琼脂粉、20‑40g/L的蔗糖、0.1‑0.2mL/L的α‑NAA和余量的水。该红心猕猴桃继代培养基根据红心猕猴桃组织继代生长所需营养成分和微量元素等的特点,研制了适合红心猕猴桃愈伤组织较快速分化出较多株芽的培养基,使用该继代培养基进行培养能够使愈伤组织成功地分化出株芽。

权利要求书

1.一种红心猕猴桃继代培养基,其特征在于,包括以下浓度的以下组分:20-30mL/L的稀释10倍的大量元素母液、5-10mL/L的稀释100倍的微量元素母液、5-10mL/L的铁盐母液、5-10mL/L的稀释50倍的有机物母液、0.1-0.2g/L的肌醇、3.5-4.8g/L的琼脂粉、20-40g/L的蔗糖、0.1-0.2mL/L的α-NAA和余量的水;所述大量元素母液包括以下浓度的以下组分:180-200g/L的KNO、150-170g/LNHNO、110-130g/L的CaCl、196-228g/L的MgSO、150-200g/L的KHPO;所述微量元素母液,包括以下浓度的以下组分:80-90mg/L的KI、650-750mg/L的HBO、2.2-2.3g/L的MnSO、382-405mg/L的ZnSO、25-30mg/L的NaMoO、1.3-2.0mg/L的CuSO和2-3mg/L的CoCl;所述铁盐母液包括按重量浓度计的以下组分:27.0-27.5g/LFeSO和27-28g/LEDTA二钠;所述有机物母液包括以下浓度的以下组分:30g/L的蔗糖、90-140mg/L的维生素B和200-210g/L的甘氨酸。2.根据权利要求1所述的红心猕猴桃继代培养基,其特征在于,包括以下浓度的以下组分:24-26mL/L的稀释10倍的大量元素母液、7-8mL/L的稀释100倍的微量元素母液、7-8mL/L的铁盐母液、7-8mL/L的稀释50倍的有机物母液、0.13-0.18g/L的肌醇、4.0-4.3g/L的琼脂粉、25-35g/L的蔗糖、0.13-0.17mL/L的α-NAA和余量的水。3.根据权利要求1所述的红心猕猴桃继代培养基,其特征在于,所述红心猕猴桃继代培养基的pH值为5.8-6.0。4.根据权利要求1所述的红心猕猴桃继代培养基,其特征在于,所述维生素B包括维生素B1、维生素B3和维生素B6。5.根据权利要求4所述的红心猕猴桃继代培养基,其特征在于,所述维生素B3、维生素B6和维生素B1的重量比为6:(5-7):(1-3)。6.一种制备权利要求1-7任一项所述的红心猕猴桃继代培养基的方法,其特征在于,包括以下步骤:大量元素母液的配制:分别称取CaCl·2HO40-45g加水溶解,称取KNO180-200g、NHNO150-170g、MgSO·7HO35-40g和KHPO15-20g,加水溶解,定容至1000mL,得到大量元素母液;微量元素母液:称取KI80-90mg,HBO650-750mg,MnSO2200-2300mg,ZnSO·7HO850-900mg,NaMoO25-30mg,CuSO·5HO2.0-3.0mg,CoCl2.0-3.0mg,加水溶解,定容至1000mL,得到微量元素母液;铁盐母液的配制:分别称取FeSO27.0-27.5g加水溶解、称取乙EDTA二钠27-28g加水溶解,定容至1000mL,得铁盐母液;有机物母液的配制:分别称取45-70mg的维生素B和100-105g的甘氨酸加水溶解、称取15g蔗糖加水溶解,混合,定容至500mL,得到有机物母液;继代培养基的配制:取肌醇0.1-0.2g、琼脂粉3.5-4.8g、蔗糖20-40g、6-BA0.1-0.3mL、α-NAA0.1-0.2mL、稀释10倍的大量元素母液20-30mL、稀释100倍的微量元素母液5-10mL、铁盐母液5-10mL、稀释50倍的有机物母液5-10mL,加热至琼脂粉融化,冷却后定容至1000mL,分装至培养瓶,盖上瓶盖;杀菌:将培养瓶置于121-125℃、压力0.15-0.3MPa灭菌,得到红心猕猴桃继代培养基。7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,继代培养基配制步骤中,琼脂粉融化后,调节pH至5.8-6.0。8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,采用稀盐酸或稀氢氧化钠溶液调节pH。

说明书

技术领域

太阳城集团本发明涉及植物组织培养技术领域,具体涉及一种红心猕猴桃继代培养基及其制备方法。

背景技术

太阳城集团红心猕猴桃(Actinidia Chinensis),别名红心果或者藤梨子。分布区域凉都六盘水,河南西峡县,陕西眉县,浙江遂昌县,四川苍溪县。是一种可食用与药用为一体的水果,每百克鲜果肉含维生素C100-420毫克,比柑橘高5-10倍,比柠檬高11-13倍,比苹果高20-80倍。红心猕猴桃果肉细嫩、香气浓郁、口感香甜清爽、酸度极低,营养丰富,看之饱眼福、食之饱口福。富含维生素C及P、K、Ca、Mg、Fe、Cu等多种矿物质和18种氨基酸,特别是微量元素中的含钙量为果中之首,被誉为“人间仙果”、被称为“果中之王”、“维C之王”,特别是微量元素中的含钙量较高。果实中的钙可直接被人体吸收,是中老年人良好的补钙剂,营养价值丰富。红心猕猴桃是新品种,属中华猕猴桃中的红肉猕猴桃变种,是特早熟红心品种,其子代遗传性状稳定,抗逆性强,果实较大,风味浓甜可口,较耐贮藏。红心猕猴桃在高、低海拔地区均能正常生长与结果,生态适应性良好,且丰产、稳产,果实品质优良,抗高温干旱能力强,具有较强的抗病虫能力,但在低海拔地区栽培,果肉红色变淡,以海拔1000米以上的地区栽培最能体现其果实红心的特性。因此,龙藏红更适宜于在海拔较高(1000-1500m)的地区种植,以充分表现其品种特色。

发明内容

太阳城集团为了克服现有技术的不足,本发明的目的是为了提供一种植株存活率高的红心猕猴桃继代培养基。

本发明的目的之二在于提供上述红心猕猴桃继代培养基的制备方法。

本发明的目的之一采用以下技术方案实现:

一种红心猕猴桃继代培养基,包括以下浓度的以下组分:20-30mL/L的稀释10倍的大量元素母液、5-10mL/L的稀释100倍的微量元素母液、5-10mL/L的铁盐母液、5-10mL/L的稀释50倍的有机物母液、0.1-0.2g/L的肌醇、3.5-4.8g/L的琼脂粉、20-40g/L的蔗糖、0.1-0.2mL/L的α-NAA和余量的水;

所述大量元素母液包括以下浓度的以下组分:180-200g/L的KNO3、150-170g/L的NH4NO3、110-130g/L的CaCl2、196-228g/L的MgSO4、150-200g/L的KH2PO4;

所述微量元素母液,包括以下浓度的以下组分:80-90mg/L的KI、650-750mg/L的H3BO3、2.2-2.3g/L的MnSO4、382-405mg/L的ZnSO4、25-30mg/L的Na2MoO4、1.3-2.0mg/L的CuSO4和2-3mg/L的CoCl2;

所述铁盐母液包括按重量浓度计的以下组分:27.0-27.5g/L FeSO4和27-28g/L EDTA二钠;

所述有机物母液包括以下浓度的以下组分:30g/L的蔗糖、90-140mg/L的维生素B和200-210g/L的甘氨酸。

进一步地,包括以下浓度的以下组分:24-26mL/L的稀释10倍的大量元素母液、7-8mL/L的稀释100倍的微量元素母液、7-8mL/L的铁盐母液、7-8mL/L的稀释50倍的有机物母液、0.13-0.18g/L的肌醇、4.0-4.3g/L的琼脂粉、25-35g/L的蔗糖、0.13-0.17mL/L的α-NAA和余量的水。

进一步地,所述红心猕猴桃继代培养基的pH值为5.8-6.0。

进一步地,所述维生素B包括维生素B1、维生素B3和维生素B6。

进一步地,所述维生素B3、维生素B6和维生素B1的重量比为6:(5-7):(1-3)。

本发明的目的之二采用以下技术方案实现:

一种制备上述的红心猕猴桃继代培养基的方法,包括以下步骤:

太阳城集团大量元素母液的配制:分别称取CaCl2·2H2O 40-45g加水溶解,称取KNO3 180-200g、NH4NO3 150-170g、MgSO4·7H2O 35-40g和KH2PO4 15-20g,加水溶解,定容至1000mL,得到大量元素母液;

微量元素母液:称取KI 80-90mg,H3BO3 650-750mg,MnSO4 2200-2300mg,ZnSO4·7H2O 850-900mg,Na2MoO4 25-30mg,CuSO4·5H2O 2.0-3.0mg,CoCl2 2.0-3.0mg,加水溶解,定容至1000mL,得到微量元素母液;

铁盐母液的配制:分别称取FeSO4 27.0-27.5g加水溶解、称取乙EDTA二钠27-28g加水溶解,定容至1000mL,得铁盐母液;

有机物母液的配制:分别称取45-70mg的维生素B和100-105g的甘氨酸加水溶解、称取15g蔗糖加水溶解,混合,定容至500mL,得到有机物母液;

太阳城集团继代培养基的配制:取肌醇0.1-0.2g、琼脂粉3.5-4.8g、蔗糖20-40g、6-BA 0.1-0.3mL、α-NAA 0.1-0.2mL、稀释10倍的大量元素母液20-30mL、稀释100倍的微量元素母液5-10mL、铁盐母液5-10mL、稀释50倍的有机物母液5-10mL,加热至琼脂粉融化,冷却后定容至1000mL,分装至培养瓶,盖上瓶盖;

太阳城集团杀菌:将培养瓶置于121-125℃、压力0.15-0.3MPa灭菌,得到红心猕猴桃继代培养基。

相比现有技术,本发明的有益效果在于:

太阳城集团本发明提供的红心猕猴桃继代培养基根据红心猕猴桃组织继代生长所需营养成分和微量元素等的特点,研制了适合红心猕猴桃愈伤组织较快速分化出较多株芽的培养基,使用该继代培养基进行培养能够使愈伤组织成功地分化出株芽。

附图说明

太阳城集团图1为愈伤组织长势图;

太阳城集团图2为实施例1的株芽分化图;

图3为实施例2的株芽分化图。

具体实施方式

下面,结合附图以及具体实施方式,对本发明做进一步描述:

本发明提供一种红心猕猴桃继代培养基,包括按体积份计的以下组分:20-30份稀释10倍的大量元素母液、5-10份稀释100倍的微量元素母液、5-10份铁盐母液、5-10份稀释50倍的有机物母液和补足至1000份的基础培养基;

所述大量元素母液包括以下浓度的以下组分:180-200g/L的KNO3、150-170g/LNH4NO3、110-130g/L的CaCl2、196-228g/L的MgSO4、150-200g/L的KH2PO4;

太阳城集团所述微量元素母液,包括以下浓度的以下组分:80-90mg/L的KI、650-750mg/L的H3BO3、2.2-2.3g/L的MnSO4、382-405mg/L的ZnSO4、25-30mg/L的Na2MoO4、1.3-2.0mg/L的CuSO4和2-3mg/L的CoCl2;

所述铁盐母液包括按重量浓度计的以下组分:27.0-27.5g/L FeSO4和27-28g/L EDTA二钠;

太阳城集团所述有机物母液包括以下浓度的以下组分:30g/L的蔗糖、90-140mg/L的维生素B和200-210g/L的甘氨酸。

太阳城集团该红心猕猴桃继代培养基根据红心猕猴桃组织继代生长所需营养成分和微量元素等的特点,研制了适合红心猕猴桃愈伤组织较快速分化出较多株芽的培养基,使用该继代培养基进行培养能够使愈伤组织成功地分化出株芽。

实施例1:

太阳城集团一种红心猕猴桃继代培养基,其制备方法包括以下步骤:

太阳城集团大量元素母液的配制:分别称取CaCl2·2H2O 43g加水溶解,称取KNO3 190g、NH4NO3160g、MgSO4·7H2O 38g和KH2PO4 18g,加水溶解,混合定容至1000mL,得到大量元素母液;

太阳城集团微量元素母液:称取KI 85mg,H3BO3 700mg,MnSO4 2250mg,ZnSO4·7H2O 25mg,Na2MoO40.28g,CuSO4·5H2O 2.5mg,CoCl2 2.5mg,加水溶解,定容至1000mL,得到微量元素母液;

铁盐母液的配制:分别称取硫酸亚铁27.3g加水溶解、称取乙二胺四乙酸二钠27.5g加水溶解,加水定容至1000mL,得铁盐母液;

有机物母液的配制:分别称取25g维生素B3、25g维生素B6、8g维生素B1和103g的甘氨酸加水溶解、称取15g蔗糖加水溶解,混合,定容至500mL,得到有机物母液;

太阳城集团继代培养基的配制:取肌醇0.15g、琼脂粉4.2g、蔗糖30g、6-BA0.2mL、α-NAA 0.15mL、稀释10倍的大量元素母液25mL、稀释100倍的微量元素母液8mL、铁盐母液8mL、稀释50倍的有机物母液7mL,pH至5.8-6.0,加热至琼脂粉融化,冷却后定容至1000mL,分装至培养瓶,盖上瓶盖;

杀菌:将培养瓶置于123℃、压力0.22MPa灭菌,得到红心猕猴桃继代培养基。

实施例2:

太阳城集团一种红心猕猴桃继代培养基,其制备方法包括以下步骤:

大量元素母液的配制:分别称取CaCl2·2H2O 45g加水溶解,称取KNO3 180g、NH4NO3170g、MgSO4·7H2O 40g和KH2PO4 20g,加水溶解,混合定容至1000mL,得到大量元素母液;

微量元素母液:称取KI 80mg,H3BO3 750mg,MnSO4 2300mg,ZnSO4·7H2O 20mg,Na2MoO4 0.25g,CuSO4·5H2O 2mg,CoCl2 2mg,加水溶解,定容至1000mL,得到微量元素母液;

铁盐母液的配制:分别称取硫酸亚铁27.5g加水溶解、称取乙二胺四乙酸二钠28g加水溶解,定容至1000mL,得铁盐母液;

太阳城集团有机物母液的配制:分别称取20g维生素B3、30g维生素B6、5g维生素B1和100g的甘氨酸加水溶解、称取16g蔗糖加水溶解,混合,定容至500mL,得到有机物母液;

太阳城集团基础培养基的配制:取肌醇0.2g、琼脂粉3.5g、蔗糖20g、6-BA0.3mL、α-NAA0.1mL、稀释10倍的大量元素母液20mL、微量元素母液6mL、铁盐母液10mL、有机物母液10mL,混合,加热至琼脂粉融化,pH至5.8-6.0,冷却后定容至1000mL,分装至培养瓶,盖上瓶盖;

太阳城集团杀菌:将培养瓶置于122℃、压力0.3MPa灭菌,得到红心猕猴桃继代培养基。

实施例3:

太阳城集团一种红心猕猴桃继代培养基,其制备方法包括以下步骤:

太阳城集团大量元素母液的配制:分别称取CaCl2·2H2O 40g加水溶解,称取KNO3 200g、NH4NO3150g、MgSO4·7H2O 35g和KH2PO4 15g,加水溶解,混合定容至1000mL,得到大量元素母液;

太阳城集团微量元素母液:称取KI 90mg,H3BO3 650mg,MnSO4 2200mg,ZnSO4·7H2O 30mg,Na2MoO4 0.3g,CuSO4·5H2O 3mg,CoCl2 3mg,加水溶解,定容至1000mL,得到微量元素母液;

铁盐母液的配制:分别称取硫酸亚铁27g加水溶解、称取乙二胺四乙酸二钠27g加水溶解,加水定容至1000mL,得铁盐母液;

太阳城集团有机物母液的配制:分别称取30g维生素B3、20g维生素B6、10g维生素B1和105g的甘氨酸加水溶解、称取15g蔗糖加水溶解,混合,定容至500mL,得到有机物母液;

太阳城集团继代培养基的配制:取肌醇0.1g、琼脂粉4.8g、蔗糖40g、6-BA 0.1mL、α-NAA 0.3mL、稀释10倍的大量元素母液30mL、稀释100倍的微量元素母液10mL、铁盐母液5mL、稀释50倍的有机物母液5mL,混合,加热至琼脂粉融化,调节pH至5.8-6.0,冷却后定容至1000mL,分装至培养瓶,盖上瓶盖;

太阳城集团杀菌:将培养瓶置于125℃、压力0.15MPa灭菌,得到红心猕猴桃继代培养基。

效果评定

太阳城集团分别取新鲜、无虫害的红心猕猴桃健康的茎,剪成1cm长度左右样品,每个培养瓶内放5个样品,经初代培养和继代培养后再于实施例1和2得到的红心猕猴桃继代培养基进行继代培养,15天后,株芽分化情况如图2和3所示。

对本领域的技术人员来说,可根据以上描述的技术方案以及构思,做出其它各种相应的改变以及形变,而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。

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