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一种治疗感冒的中药组合物及其制备方法.pdf

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一种 治疗 感冒 中药 组合 及其 制备 方法
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摘要
申请专利号:

CN201110073726.4

申请日:

20110325

公开号:

CN102688332B

公开日:

20150826

当前法律状态:

有效性:

有效

法律详情:
IPC分类号: A61K36/78,A61P11/02,A61P31/04,A61P31/14,A61P31/16 主分类号: A61K36/78,A61P11/02,A61P31/04,A61P31/14,A61P31/16
申请人: 江苏康缘药业股份有限公司
发明人: 王永炎,李慧,萧伟,周爱香,杨立新,臧琛,李洪梅
地址: 222047 江苏省连云港市经济技术开发区泰山北路58号
优先权: CN201110073726A
专利代理机构: 代理人:
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法律状态
申请(专利)号:

CN201110073726.4

授权太阳城集团号:

法律状态太阳城集团日:

法律状态类型:

摘要

太阳城集团本发明提供一种治疗感冒的中药组合物,是由以下重量份的原料药制成:鱼腥草3~8、金银花3~8、赤芍1~5、薄荷0.5~3、艾叶1~5。制法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水5~15倍量,水蒸汽蒸馏2~10小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水5~15倍,热回流提取1~3次,每次0.5~3小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩,浓缩液加入80%~100%乙醇至乙醇浓度为65%~75%,冷藏,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,加入制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制剂成型。

权利要求书

太阳城集团1.一种中药组合物,其特征在于该中药组合物由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草3~8、金银花3~8、赤芍1~5、薄荷0.5~3、艾叶1~5;其制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水5~15倍量,水蒸汽蒸馏2~10小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水5~15倍,回流提取1~3次,每次0.5~3小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入80%~100%乙醇至乙醇浓度为65%~75%,冷藏,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制剂成型,即得。2.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于该中药组合物由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草8、金银花8、赤芍5、薄荷3、艾叶5。3.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于该中药组合物由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草3、金银花3、赤芍1、薄荷0.5、艾叶1。4.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于该中药组合物由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草7、金银花6、赤芍4、薄荷2、艾叶4。5.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于该中药组合物由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草5、金银花5、赤芍3、薄荷1、艾叶2。6.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于该中药组合物由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草4、金银花4、赤芍2、薄荷1、艾叶1。7.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,该中药组合物的制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水10倍量,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水10倍,回流提取2次,每次2小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入95%乙醇至乙醇浓度为70%,冷藏过夜,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制成片剂、硬胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊剂、口服液体制剂、喷雾剂。8.根据权利要求7所述的中药组合物,其特征在于,其制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水10倍量,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水10倍,回流提取2次,每次2小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入95%乙醇至乙醇浓度为70%,冷藏过夜,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,加水,滤过,加羟苯乙酯,甜菊苷,灭菌,分装于喷雾瓶中,即得。9.一种中药组合物,其特征在于,该中药组合物由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草3~8、金银花3~8、赤芍1~5、薄荷0.5~3、艾叶1~5;其制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加5~15倍量水,水蒸汽蒸馏4~8小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,得β-环糊精包合物,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加4~12倍量水,加热提取1~5次,每次0.5~2h,提取液与水提液I合并,浓缩,离心,取上清液继续浓缩至稠膏,干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制剂成型,即得。10.根据权利要求9所述的中药组合物,其特征在于,该中药组合物的制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加10倍量水,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加8倍量水,加热密闭提取3次,每次1h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制成片剂、硬胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊剂、口服液体制剂、喷雾剂。11.根据权利要求10所述的中药组合物,其特征在于,其制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加10倍量水,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加8倍量水,加热密闭提取3次,每次1h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入蔗糖粉、淀粉、阿司帕坦、巧克力香精,混匀后加入含10%聚乙烯基吡咯烷酮的85%乙醇溶液,制粒,干燥后整粒,加入0.3%硬脂酸镁,混合均匀,制成口含片。12.根据权利要求1至6或权利要求9中任一权利要求所述的中药组合物,其特征在于,该中药组合物在制备治疗普通感冒药物或治疗流行性感冒药物或抗病毒药物或抑菌药物中的应用。

说明书

技术领域:

本发明属于中药领域,涉及一种中药组合物,具体涉及一种治疗感冒的中药组合物及其制备方法与用途。

背景技术:

太阳城集团感冒,总体上分为普通感冒(common cold)和流行性感冒(influenza,epidemic influenza,grippe)。普通感冒,中医称“伤风”,是由呼吸道病毒引起的,其中以冠状病毒和鼻病毒为主要致病病毒。流行性感冒,是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病。中医认为,感冒是因外邪侵袭人体所引起的以头痛、鼻塞、鼻涕、喷嚏、恶风寒、发热、脉浮等为主要临床表现的病症。

太阳城集团感冒及流行性感冒都是由病毒感染引起的。由于病毒是经由空气传播,因此首当其冲的是鼻子。病毒首先感染鼻黏膜,然后不断繁殖,引致鼻黏膜发炎,出现打喷嚏、流鼻涕、鼻塞等病症。一般的感冒对人体的影响通常只限于呼吸系统,所有症状都与鼻有关,如鼻涕、鼻塞和喉咙痛、咳嗽、甚至发烧等。一般数天后便可痊愈。流行性感冒的症状影响全身,包括发热发冷、出汗、全身酸痛、头痛、骨痛、肌肉痛、疲倦乏力、食欲不振、咳嗽、鼻塞等,严重时会引起肺炎及其他并发症,可以致命。

本发明提供一种中药组合物,该药物是发明人集多年的科研思维与大量临床实践,在反复的实验验证后总结出来的,主要用于普通感冒及流行性感冒的治疗。

发明内容:

本发明的目的是提供一种中药组合物;

本发明的另一目的是提供该中药组合物的制备方法;

太阳城集团本发明的目的还在于提供该中药组合物的用途。

本发明的目的是通过以下方式实现的:

一种中药组合物,该中药组合物由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草3~8、金银花3~8、赤芍1~5、薄荷0.5~3、艾叶1~5。

太阳城集团上述原料,鱼腥草为三白草科植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的干燥地上部分;金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花;赤芍为毛莨科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根;艾叶为菊科植物艾Artemisia argyi Levl.et Vant.的干燥叶;薄荷为唇形科植物薄荷Mentha haplocalyx Briq.的干燥地上部分。

太阳城集团所述中药组合物优选由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草8、金银花8、赤芍5、薄荷3、艾叶5。

所述中药组合物优选由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草3、金银花3、赤芍1、薄荷0.5、艾叶1。

太阳城集团所述中药组合物优选由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草7、金银花6、赤芍4、薄荷2、艾叶4。

太阳城集团所述中药组合物优选由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草5、金银花5、赤芍3、薄荷1、艾叶2。

所述中药组合物优选由以下重量份的原料药制成的:鱼腥草4、金银花4、赤芍2、薄荷1、艾叶1。

太阳城集团上述中药组合物的制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水5~15倍量,水蒸汽蒸馏2~10小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水5~15倍,回流提取1~3次,每次0.5~3小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入80%~100%乙醇至乙醇浓度为65%~75%,冷藏,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制剂成型,即得。

上述制备方法的优选为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水10倍量,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水10倍,回流提取2次,每次2小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入95%乙醇至乙醇浓度为70%,冷藏过夜,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制成片剂、口含片、硬胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊剂、口服液体制剂、喷雾剂。

太阳城集团本发明中药组合物优选的剂型为喷雾剂,其制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水10倍量,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水10倍,回流提取2次,每次2小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入95%乙醇至乙醇浓度为70%,冷藏过夜,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,加水,滤过,加羟苯乙酯,甜菊苷,灭菌,分装于喷雾瓶中,即得。

本发明中药组合物还可以采用如下制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加60~80%乙醇5~15倍量,回流提取1~5次,每次0.5~5小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制剂成型,即得。

上述制备方法的优选为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加70%乙醇8倍量,回流提取2次,每次2小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制成片剂、口含片、硬胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊剂、口服液体制剂、喷雾剂。

太阳城集团本发明中药组合物优选的剂型为喷雾剂,其制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加70%乙醇8倍量,回流提取2次,每次2小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液加羟苯乙酯,甜菊苷,灭菌,分装于喷雾瓶中,即得。

本发明中药组合物还可以采用如下制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加5~15倍量水,水蒸汽蒸馏4~8小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,得β-环糊精包合物,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加4~12倍量水,加热提取1~5次,每次0.5~2h,提取液与水提液I合并,浓缩,离心,取上清液继续浓缩至稠膏,于燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制成片剂、口含片、硬胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊剂、口服液体制剂、喷雾剂。

上述制备方法的优选为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加10倍量水,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加8倍量水,加热密闭提取3次,每次1h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入中药制剂中的常规药用辅料,采用药剂学中常规的制药方法,制成片剂、口含片、硬胶囊剂、丸剂、颗粒剂、软胶囊剂、口服液体制剂、喷雾剂。

本发明中药组合物优选的剂型为还有口含片,其制备方法为:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加10倍量水,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加8倍量水,加热密闭提取3次,每次1h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入蔗糖粉、淀粉、阿司帕坦、巧克力香精,混匀后加入含10%聚乙烯基吡咯烷酮的85%乙醇溶液,制粒,于燥后整粒,加入0.3%硬脂酸镁,混合均匀,制成口含片。

所述中药组合物用于在制备普通感冒药物中的应用。

太阳城集团所述中药组合物用于在制备流行性感冒药物中的应用。

太阳城集团所述中药组合物用于在制备抗病毒药物中的应用。

所述中药组合物用于在制备抑菌药物中的应用。

太阳城集团除上述制备方法外,利用本发明提供的中药组合物,采用其他制备方法也可以具有本发明中药组合物的作用疗效。

太阳城集团对本发明中药组合物药效学的研究与说明:

发明人对本发明的提供的技术方案进行了实验研究,用来证明本发明的技术效果,下述实验用于进一步说明本发明的技术效果,但不限制本发明。

实验例1:工艺筛选实验

工艺1:取鱼腥草75g、金银花75g、薄荷15g、艾叶30g共195g,加水1950mL,水蒸汽蒸馏6h,收集挥发油0.4mL,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍45g,加水2400mL,回流提取1次,每次1h,提取液滤过,与水提液I合并,冷藏过夜,冷藏液离心,3500转/min,20min,浓缩至稠膏,减压干燥,得干燥浸膏净重62.1g;干浸膏与挥发油合并混合,混合药粉净重64.927g,相当于3.696g生药/1g药粉。

太阳城集团工艺2:取鱼腥草75g、金银花75g、薄荷15g、艾叶30g共195g,加水1950mL,水蒸汽蒸馏6h,收集挥发油0.4mL,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍45g,加水2400mL,回流提取1次,每次1h,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩至300mL,加入95%乙醇840mL至醇浓度70%,冷藏过夜,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液,减压干燥,得干浸膏净重33.6g;干浸膏与挥发油合并后混合药粉净重36.528g,相当于6.57g生药/1g药粉。

工艺3:取鱼腥草75g、金银花75g、赤芍45g、薄荷15g、艾叶30g共240g,加70%乙醇1920mL,回流提取2次。每次2h,提取液合并,过滤,滤液浓缩至稠膏,减压干燥,得干浸膏净重50.8g相当于4.274g生药/1g药粉。

工艺4:取鱼腥草75g、金银花75g、赤芍45g、薄荷15g、艾叶30g共240g,加水2400mL,水蒸汽蒸馏6h,收集挥发油0.4mL,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入70%乙醇1920mL回流提取1次,每次1h,提取液冷藏过夜,冷藏液离心,3500转/min,20min,浓缩,得浓缩液I;水提液I冷藏过夜,冷藏液离心,3500转/min,20min,浓缩,得浓缩液II;合并浓缩液I与缩液II,并浓缩至稠膏,减压干燥,得干浸膏65g;干浸膏与挥发油合并后混合药粉净重67.885g,相当于3.535g生药/1g药粉。

工艺5:取鱼腥草75g、金银花75g、赤芍45g、薄荷15g、艾叶30g共240g,加水2400mL,水蒸汽蒸馏6h,收集挥发油0.5mL,挥发油用β-环糊精包合,冷臧过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加8倍量水,加热密闭提取3次,每次1h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,混合药粉净重72.365g,相当于3.316g生药/1g药粉。

五种工艺样品抗病毒、抑菌作用试验

【试验材料】

动物:CD-1(ICR)/SPF小鼠,13~15g(抗病毒试验)、16~18g(抑菌试验),均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,饲养于屏障环境。

太阳城集团受试药物:工艺1药物、工艺2药物、工艺3药物、工艺4药物、工艺5药物。

剂量设计:体内抗病毒试验:按人临床最大用量67g生药/天,以60公斤体重计算为1.12g生药/kg体重,按动物与人公斤等效剂量折算,体内试验小鼠用12.3g生药/kg体重,相当于临床等效剂量,另设低一倍剂量6.1g生药/kg体重。

灌胃容积:小鼠为0.2mL/10g;

体外抗病毒、抑菌试验:以三蒸水配制成1g生药/mL,隔水煮沸20分钟灭菌待用。

病毒:流感病毒甲3型(A3)、副流感病毒1型(HVJ)、呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒1型(HSV-1),用于体外实验;流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1,用于体内试验,购自中国预防医学科学院病毒学研究所,本实验室传代后保存于-60℃冰箱备用。

细胞:流感病毒甲3型(A3)用MDCK细胞(犬肾),其余病毒用人喉癌传代细胞Hep-2株,购自卫生部药品生物制品检定所。

细胞培养液:来自Hyclone的DMEM(含Earle’s L-谷氨酰胺2.0mM),用时加10%小牛血清。

细胞维持液:除所含小牛血清为2%外,其他含量均同培养液。

细菌:标准株:金黄色葡萄球菌26112-9、大肠杆菌44113-10、绿脓假单胞菌10211-7、表皮葡萄球菌26069-6、肺炎克雷伯氏菌46114-8、白色念球菌98001-3b各1株。

临床分离株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌各3株,白色念球菌5株。由中国药品生物制品检定所提供。

太阳城集团细菌培养基:营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、沙氏琼脂培养基、液体沙氏培养基,均由中国药品生物制品检定所监制。

仪器:CO2培养箱,日本SANYO公司MCO-15AC型。倒置显微镜,OLYMPUS牌。

【试验方法和结果】

1.体外抗病毒试验

太阳城集团1.1对Hep-2培养细胞的毒性试验

方法  按常规实验操作,将五种工艺药物分别配成1g生药/mL,隔水煮沸消毒20分钟,离心5分钟沉淀后,用于试验。将瓶中Hep-2细胞消化下来,接种于96孔细胞培养板中,置37℃5%CO2培养箱中培养2天,长成单层细胞后,进行试验:将培养板中的培养液倾去,将五种工艺药物以维持液倍比稀释7个浓度,加入板中200μl/孔,留1列不加药液作正常细胞对照。将培养板置37℃5%CO2培养箱中培养3天,每日用倒置显微镜观察药液对细胞的影响。判断标准如下:

毒性实验结果判断:

太阳城集团以下结果表中的数字表示药物对细胞的毒性程度分级:

“-”:表示细胞生长基本正常,未出现中毒现象;

“1”:表示中毒细胞发生率在25%以下;

“2”:表示中毒细胞发生率在25%~50%之间;

“3”:表示中毒细胞发生率在50%~75%之间;

太阳城集团“4”:表示中毒细胞已在75%以上。

若毒性为“1”及其以下“-”,则视为阴性,可认为此浓度药样对细胞无中毒现象,其余的“2”及其以上各级,均视为阳性,即所试药样在此浓度对细胞有中毒作用。利用Reed-Muench法计算50%中毒浓度(TC50)。

结果:按上述方法计算结果如下:五种工艺药物试验所用细胞的最大无毒浓度(TC0)分别为工艺1药物为1∶256(7.8mg生药/mL),工艺2药物为1∶128(15.6mg生药/mL),工艺3药物为1∶128(15.6mg生药/mL),工艺4药物为1∶256(7.8mg生药/mL),工艺5药物为1∶128(15.6mg生药/mL)。

选择对细胞生长无影响的最大无毒浓度TC0及其以下浓度开展抗病毒试验。

太阳城集团1.2各病毒滴度(TCID50)的测定

按常规实验操作,将瓶中Hep-2细胞消化下来,接种于96孔细胞培养板中,置37℃5%℃O2培养箱中培养2天,长成单层细胞后,进行病毒毒力滴定试验,测定出各病毒的滴度(TCID50)。具体操作为:将各病毒以细胞维持液作10倍连续稀释7个浓度,倒去细胞板中培养液,加入维持液100μl/孔,再将每稀释度病毒液加入板中4孔,每孔100μl,留1行不加病毒液改加维持液作为正常细胞对照。置37℃5%CO2培养箱中培养,次日开始观察细胞病变(CPE)3天,以最后1日的CPE为准(判断标准同下),以Reed-Muench法计算各病毒的TCID50。

表1按上述方法滴定结果如下:

  病毒   A3   RSV   HVJ   HSV-1   HSV-2   CoxB4   ADV3   ADV7   TCID50   -4   -6   -5   -4   -4   -6   -4   -4

1.3对病毒致细胞病变作用的影响

太阳城集团用细胞维持液将各工艺样品TC02倍稀释7个浓度。已长成单层细胞的培养板,倒掉培养液,每浓度接种感染细胞3孔,100μl/孔。另设1行不加药液作病毒对照(100TCID50病毒液)和1行为未感染未加药的正常细胞对照。置37℃5%CO2培养箱中培养3天,每日在倒置显微镜下镜检CPE进展。细胞病变程度的判断:

“-”:细胞生长正常,无病变出现;

太阳城集团“1”:细胞病变约占整个单层细胞的<25%;

“2”:细胞病变约占整个单层细胞的25%~50%;

“3”:细胞病变约占整个单层细胞的50%~75%;

太阳城集团“4”:细胞病变约占整个单层细胞的75%~100%。

根据以上细胞病变五级标准判断,利用Reed-Muench法计算50%有效浓度(EC50),并求出治疗指数(TI=TC50/EC50),TI值越高,表明药效作用越强。结果见表2。

太阳城集团表2五种工艺药物对病毒的IC50和TI

2.体内抗病毒试验

2.1五种工艺药物灌胃给药对小鼠流感病毒性肺炎的影响

太阳城集团方法:取13~15g小鼠,按体重随机分为12组,分别为正常对照组,病毒对照组,工艺1-5药物各高、低两个剂量组,每组10只。除正常对照组外,小鼠用乙醚轻度麻醉,以15LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染,每只0.05mL。感染后开始灌胃给药,每天1次,连续5天。第6天称取小鼠体重后固定,放血、解剖,摘取全肺称重,计算肺重量指数,并求出肺指数抑制率。

太阳城集团肺重量指数=[肺重(g)/体重(g)]×100

太阳城集团肺重量指数值大,表示肺病变程度严重。将各组平均肺指数值进行t检验,比较组间差异性。

表3五种工艺药物灌胃给药对流感病毒感染小鼠肺重量指数的影响

与病毒对照组相比p<0.05,p<0.01以下均同

表4五种工艺药物灌胃给药对流感病毒感染小鼠肺重量指数的影响

太阳城集团结果:表3和4结果可见,感染病毒后小鼠肺重量指数值明显升高,工艺2药物在4.4~8.8生药/kg体重、工艺3药物在6.1~8.8g生药/kg、工艺5药物在4.4~8.8生药/kg体重体重剂量范围明显抑制肺重量指数值,与感染对照组相比有显著性差异。

太阳城集团2.2五种工艺药物喷雾给药对小鼠流感病毒性肺炎的影响

太阳城集团方法:取13~15g小鼠,按体重随机分为12组,分别为正常对照组,病毒对照组,工艺1-5各高、低两个剂量组,每组10只。除正常对照组外,小鼠用乙醚轻度麻醉,以15LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染,每只0.05mL。感染后开始喷雾给药,高剂量每天2次,低剂量每天1次,连续5天。第6天称取小鼠体重后固定,放血、解剖,摘取全肺称重,计算肺重量指数,并求出肺指数抑制率。

太阳城集团肺重量指数=[肺重(g)/体重(g)]×100

太阳城集团肺重量指数值大,表示肺病变程度严重。将各组平均肺指数值进行t检验,比较组间差异性。

太阳城集团表5五种工艺药物喷雾给药对流感病毒感染小鼠肺重量指数的影响

太阳城集团结果  表5结果可见,感染病毒后小鼠肺重量指数值明显升高,各给药组肺指数值与感染对照组相比均有不同程度的降低。

3.五种工艺药物体外抑菌试验(液体稀释法)

太阳城集团采用液体稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),然后将未长菌的最高稀释度液转接种于琼脂平板培养基上,经培养24小时后,观察是否有菌生长,判定最低杀菌浓度(MBC)。

太阳城集团结果:实验结果表明,五种工艺药物在体外对所试的6种细菌26株菌株,均有不同程度的抑制作用,详见表6(表6-1、表6-2、表6-3、表6-4、表6-5)。

表6五种工艺药物对各种细菌的平均最低抑菌浓度和平均最低杀菌浓度

太阳城集团表6-1工艺1药物                            (X±SD,g生药/mL)

表6-2工艺2药物                            (X±SD,g生药/mL)

表6-3工艺3药物                            (X±SD,g生药/mL)

太阳城集团表6-4工艺4药物                        (X±SD,g生药/mL)

注:()内的数字为菌株数,MIC为最低抑菌浓度,MBC为最低杀菌浓度。

表6-5工艺5药物                        (X±SD,g生药/mL)

小结:体内抗病毒试验表明:灌胃给予小鼠五种工艺制备的药物,工艺2药物、工艺3药物、工艺5药物有显著的抗病毒作用。

体外抑菌试验表明:五种工艺药物对金葡等6种菌株具有不同程度的抑菌作用。

太阳城集团综上,以上五种制备工艺均有一定的抗病毒、抑菌作用,优选的制备工艺为工艺2、工艺3和工艺5。

太阳城集团实验例2:本发明中药组合物抑菌效果试验

太阳城集团为验证本发明中药组合物的效果,按照GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C4的方法对本发明中药组合物进行抑菌效果试验。

1.材料与仪器

1.1试验菌株金黄色葡萄球菌(ATCC6538)第7~9代,大肠菌群(8099)第5~7代,白色念珠菌(ATCC10231)第5~6代,购于军事医学科学院微生物流行病所。

1.2试验药物:本发明实施例28的药物

1.3稀释剂:磷酸盐缓冲液(PBS 0.03mol/L,PH7.2)。

1.4培养基:普通营养琼脂培养基和沙堡氏琼脂培养基。

2.方法

太阳城集团2.1监测依据GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C4。

太阳城集团2.2环境温度20℃~21℃;试验重复3次。

3.方法和实验依据

3.1样品采集以及样品处理

准确称取10g±1g样品用水溶解或稀释制备样液,PBS缓冲溶液作空白对照。

3.2活菌培养计数

太阳城集团将试验菌24h斜面培养物用PBS洗下,制成菌悬液(要求的浓度为:用100μl滴于5ml对照样液内,回收菌数为1×104~9×104cfu/mL)。

太阳城集团取被试样液和对照样液(经灭菌处理)各4管(5mL)。

取上述菌悬液,分别在每个被试样液和对照样液内滴加100μl,均匀混合。开始计时,作用2、5、10、20min,无菌条件下吸取样液(0.5mL)投人含5mL PBS的试管内,充分混匀,作适当稀释,然后取其中2~3个稀释度,分别吸取0.5mL,接种到5个平皿上培养,并进行活菌培养计数。

试验重复3次,按式(C)计算抑菌率:

X=(A-B)/A×100%.....................................(C)

太阳城集团式中:X:抑菌率,%;

      A:对照样品平均菌落数;

太阳城集团      B:被试样品平均菌落数。

3.3结果报告

当细菌总数在100以内,按实际菌数报告,大于100时采用二位有效数字。如果样品菌落数超过标准值时,按下述方法进行复检和报告。

3.4复检

取留存的复检样品依前复测2次,2次结果达到标准值的规定者,则判定被检测样品合格;如一次结果平均值超过标准值规定,则判定被检样品不合格。

3.5大肠菌群检测方法

按照《消毒技术规范》附录B3进行。

太阳城集团3.6金黄色葡萄球菌检测方法

按照《消毒技术规范》附录B5进行。

太阳城集团3.7真菌菌落总数检测方法

按照《消毒技术规范》附录B8进行。

4.结果

(1)在20℃~21℃条件下,重复试验,结果表明,本发明中药组合物作用2min,对金黄色葡萄球菌的抑菌率各次试验均达到100%,阳性对照组2min、5min、10min、20min平均菌数分别为62333cfu/mL、59667cfu/mL、65000cfu/mL、60667cfu/mL,PBS空白溶液、空白培养基均无菌生长,见表7。

太阳城集团表7本发明中药组合物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用

(2)在20℃~21℃条件下,重复试验,结果表明,本发明中药组合物作用2min,对大肠肝菌的抑菌率各次试验均达到100%,阳性对照组2min、5min、10min、20min平均菌数分别为78000cfu/mL、76000cfu/mL、78000cfu/mL、77000cfu/mL,PBS空白溶液、空白培养基均无菌生长,见表8。

表8本发明中药组合物对大肠肝菌的抑菌作用

太阳城集团(3)在20℃~21℃条件下,重复试验结果表明,本发明中药组合物作用2min,对白色念珠菌的抑菌率各次试验均达到100%,阳性对照组2min、5min、10min、20min平均菌数分别为59333cfu/mL、63667cfu/mL、62000cfu/mL、61333cfu/mL,PBS空白溶液、空白培养基均无菌生长,见表9。

太阳城集团表9本发明中药组合物对白色念珠菌的抑菌作用

采用与上述实验相同的方法,对本发明实施例8药物进行实验研究,即试验样品为本发明实施例8药物,实验结果见表10、表11、表12。

表10本发明中药组合物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用

表11本发明中药组合物对大肠肝菌的抑菌作用

表12本发明中药组合物对白色念珠菌的抑菌作用

5.结论

依据GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C4,本发明中药组合物在试验温度20℃~21℃条件下,作用2min,对金黄色葡萄球菌、大肠肝菌、白色念珠菌的平均抑菌率均达到100%,具有较强的抑菌作用。

太阳城集团实验例3:对酵母致发热大鼠模型解热作用的实验研究

1.实验目的

通过复制酵母致大鼠发热模型,观察本发明中药组合物的解热作用。

2.实验材料

2.1试验药物与试剂

太阳城集团2.1.1供试品:本发明实施例28药物。

太阳城集团2.1.2对照药:安乃近片:0.5g×2片/袋,西安利君制药有限公司。

2.1.3试剂:酵母(食用):20g/袋,湖北安琪酵母股份有限公司提供。

太阳城集团2.2实验动物:SD大鼠60只,雄性,体重200~220g,清洁级,浙江省实验动物中心提供。

2.3主要仪器:电子体温计。

3.实验方法

3.1造模方法:取雄性SD大鼠60只,每日适应性测肛温1次,连续2d,并取2天平均体温作基础体温,于第3天皮下注射20%酵母混悬液1.5mL/只,6小时后选择体温较基础体温升高0.8℃以上者为造模成功大鼠。

太阳城集团3.2动物处理:所有大鼠均按上述方法造模,将成模大鼠按体温变化随机分成5组,即模型组、安乃近组、实施例28药物高剂量组、实施例28药物中剂量组、实施例28药物低剂量组,每组9只。分组后立即灌胃给药,模型组给予等容积的蒸馏水,安乃近组给安乃近混悬液0.09g/kg,实施例28药物高剂量组给实施例28药物10.0g生药/kg体重,实施例28药物中剂量组给实施例28药物5.0g生药/kg体重,实施例28药物低剂量组给实施例28药物2.5g生药/kg体重。各组给药容积为10mL/kg。给药后1h测量第一次体温,随即第二次给药,方法剂量同上。

3.3观测指标:于给药后1h、2h、3h、4h、5h测各组大鼠体温并记录。

太阳城集团3.4统计方法:所有计量资料采用表示,采用t检验比较组间差异。

4.实验结果与结论

太阳城集团实验结果见表13,与模型组升温比较,实施例28药物三个剂量组在5个时段体温均有极其显著差异(P<0.001),实施例28药物高、中剂量组和安乃近组比较无显著性差异(P>0.05)。

太阳城集团表13实施例28药物对酵母致发热大鼠模型体温的影响

太阳城集团与模型组比较#P<0.001

采用与上述实验相同的方法,对本发明实施例8药物进行实验研究,即供试品为本发明实施例8药物,实验结果见表14。

太阳城集团表14实施例8药物对酵母致发热大鼠模型体温的影响

太阳城集团与模型组比较#P<0.001

太阳城集团5.实验结论:本发明中药组合物对酵母致发热大鼠模型有较好的解热作用。

实验例4:镇痛作用的实验研究

1.试验目的:通过比较本发明中药组合物对醋酸引起小鼠疼痛的抑制作用,观察其镇痛作用。

2.试验材料

2.1试验动物:50只雄性ICR小鼠,体重18~22g,购自南京军区总医院。

2.2药物与试剂

试验药物:本发明实施例4药物,本发明实施例8药物。

阳性药物:阿司匹林,南京制药厂提供;

试剂:醋酸(AR),由天津市凯通化学试剂有限公司生产。

3.试验方法

50只小鼠随机分成5组,每组10只:正常对照组,阿斯匹林组给阿斯匹林混悬液0.25g/kg,实施例3药物高剂量组给实施例3药物10.0g生药/kg体重,实施例3药物中剂量组给实施例3药物5.0g生药/kg体重,实施例3药物低剂量组给实施例3药物2.5g生药/kg体重。各组按相应剂量灌胃给药,给药体积0.1mL/10g。给药后30分钟腹腔注射0.6%醋酸0.2mL/只,记录30分钟内各鼠的扭体次数。

4.试验结果与结论

实验结果见表15,与正常对照组比较,阿斯匹林组、实施例4药物三个剂量组给药后能显著减少醋酸引起的小鼠扭体反应(p<0.05或p<0.01)。

太阳城集团表15实施例4药物的镇痛作用(x±s,n=10)

太阳城集团与正常对照组比较:*p<0.05,**p<0.01

太阳城集团采用与上述实验相同的方法,对本发明实施例8药物进行实验研究,即试验药物为本发明实施例8药物,实验结果见表16。

太阳城集团表16实施例8药物的镇痛作用(x±s,n=10)

太阳城集团与正常对照组比较:*p<0.05,**p<0.01

太阳城集团5.试验结论:本发明中药组合物具有显著抑制醋酸引起小鼠疼痛的作用。

实验例5:体外抗病毒作用

太阳城集团1.试验目的:观察本发明中药组合物体外抗病毒作用,以判定其疗效,为临床应用提供药效学依据。

2.试验材料

太阳城集团2.1试验药物:本发明实施例28药物,本发明实施例16药物

2.2毒种:柯萨奇病毒CVB3型和7型及合胞病毒(RSV)均由南京中医药大学瘟病学教研室提供。于鸡胚尿囊腔传代4次。并测定其TCID50。

2.3实验仪器设备:细胞培养板(美国Corning公司);CO2孵箱(美国Shel-lab公司)

太阳城集团2.4培养基:IMDM(美国GIBC产品)

3.试验方法

3.1药液的配制:用Hank’s液将实施例28药物和实施例16药物按1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320和1∶640比例进行稀释。

太阳城集团3.2药物对HeLa细胞的最大无毒浓度(TD0)测定:在96孔细胞培养板的HeLa单层细胞中,分别加入不同质量浓度的药物,置37℃、5%CO2培养箱中培养96h,观察细胞病变。

3.3病毒毒力测定:96孔板培养HeLa单层细胞,接种CVB3和RSV不同稀释度(10-1~10-10/mL)病毒液,每一稀释度接种6孔,置37℃培养96h,观察细胞病变,确定其TCID50。

3.4本发明中药组合物对细胞病变的抑制试验:实验测得本发明中药组合物对HeLa细胞的最大无毒浓度均为300g/mL。在两个96孔培养板的HeLa单层细胞内,每孔感染CVB3和RSV100TCID50,2h后倾去病毒液,分别加入不同质量浓度的本发明中药组合物,培养96h后观察细胞病变。(“-”表示无细胞病变;“+”表示有25%细胞发生病变;“++”表示有50%细胞发生病变;“+++”表示有75%细胞发生病变;“++++”表示有100%细胞发生病变)。

4.试验结果与结论

各组细胞病变如表17、表18所示,结果表明,本发明本发明中药组合物浓度为300g/mL时对HeLa细胞有保护作用,可以显著抑制CVB3及RSV的活性,显示出较强的抗病毒作用。

太阳城集团表17实施例28药物对CVB3感染的HeLa细胞的治疗作用

表18实施例16药物对RSV感染的HeLa细胞的治疗作用

实验例6:对甲型FM1流感病毒感染小鼠病毒性肺炎的影响

1.试验目的

观察本发明中药组合物对感染病毒性肺炎小鼠的影响,了解本品的抗病毒作用。

2.试验材料

2.1试验动物

太阳城集团健康成年昆明小鼠120只,雄性,清洁级,体重18~22g,由南京军区总医院提供。

2.2试验药物

本发明实施例5药物、本发明实施例8药物。

太阳城集团双黄连粉针剂,由哈药集团中药二厂提供。

2.3毒种

甲型流感病毒FM1鼠肺适应株,由南京中医药大学瘟病学教研室提供,经小鼠增强毒力后,于鸡胚尿囊腔传代4次,并测定其半数死量(LD50)。

3.试验方法

3.1稀释病毒

太阳城集团试验前,取毒种用流水冲浸融化,以无菌盐水稀释成每0.05毫升含20个LD50,放冰水中保存。

3.2感染小鼠

把小鼠随机分阳性药物组(双黄连)、病毒对照及试验药物组,每组20只。在乙醚轻度麻醉下,用已滴定流感病毒液滴鼻感染,每鼠4滴,药0.05毫升(20个LD50)。同时设正常小鼠对照组。

3.3给药

小鼠按临床等效药量的0.5倍、1倍、2倍给药,阳性药物(双黄连)对照组用药量为5.0g/kg,无菌过滤。以上药物均在病毒攻击前一天开始尾静脉注射给药,每天一次,共给药五天。

3.4测定肺脂数

太阳城集团感染后四天,杀剖小鼠,杀剖前禁食禁水4小时以上。称小鼠体重,处死后取出鼠肺,记录病变程度,将肺放在盛有0.9%生理盐水的平皿中洗涤二次,用吸水纸吸干表面水分,称出肺重。按以下公式算出肺脂数与抑制率:

4.试验结果

实验结果见表19,与模型组比较,本发明中药组合物高、中剂量组肺指数均显著降低。

表19实施例5药物对小鼠感染流感病毒性肺炎的影响

太阳城集团与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01。

采用与上述实验相同的方法,对本发明实施例8药物进行实验研究,即试验药物为本发明实施例8药物,实验结果见表20。

太阳城集团表20实施例8药物对小鼠感染流感病毒性肺炎的影响

与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01。

5.实验结论

太阳城集团结果表明,本发明本发明中药组合物对感染流感病毒的小鼠肺具有显著的保护作用,显示出较好的抗病毒作用。

实验例7:对甲型FM1流感病毒感染小鼠的保护作用

1.试验目的

观察本发明中药组合物体内抗病毒作用,以判定其疗效。

2.试验材料

2.1试验药物

本发明实施例28药物、本发明实施例8药物。

双黄连粉针剂,由哈药集团中药二厂提供。

2.2动物

健康成年昆明小鼠100只,雄性,清洁级,体重18~22g,由南京军区南京总医院提供。

2.3毒种

甲型流感病毒FM1鼠肺适应株由南京中医药大学瘟病学教研室提供,经小鼠增强毒力后,于鸡胚尿囊腔传代4次,并测定其半数死量(LD50)。

3.试验方法

3.1稀释病毒

太阳城集团试验前,取毒种用无菌生理盐水稀释成每0.05毫升含20个LD50,放冰水中保存。

3.2感染小鼠

100只小鼠随机分5组,每组20只,分别为阳性药物组(双黄连)、正常对照组、本发明中药组合物高剂量组、中剂量组、低剂量组。在乙醚轻度麻醉下,用已滴定流感病毒液滴鼻感染,每鼠4滴,约0.05毫升(相当于20个LD50)。

3.3剂量设计及给药

小鼠按临床等效剂量的0.5倍、1倍、2倍给药,阳性药物(双黄连)对照组用药量为5.0g/kg。以上药物均在病毒攻击后6小时开始给药,共给药12天,每天一次,静脉注射给药。

3.4观察

太阳城集团逐日观察动物发病与死亡数,共观察15天,若逾15天仍不死亡者以15天计,二天之内死亡者不计。

4.试验结果

太阳城集团实验结果见表19,实施例28药物高、中剂量组与正常对照组相比,在平均存活太阳城集团、存活率上均有显著性差异(p<0.05或p<0.01),且具有一定剂量依赖性。

表21实施例28药物对流感病毒感染小鼠的保护作用(n=20)

太阳城集团与模型组比较:*P<0.05;**P<0.01

采用与上述实验相同的方法,对本发明实施例8药物进行实验研究,即试验药物为本发明实施例8药物,实验结果见表22。

表22实施例8药物对流感病毒感染小鼠的保护作用(n=20)

与模型组比较:*P<0.05;**P<0.01

5.试验结论

本发明中药组合物对甲型流感病毒FM1株感染小鼠具有的保护作用。

实验例8:对甲型H1N1流感病毒抑制作用实验研究

1.实验材料

1.1细胞与病毒

太阳城集团MDCK细胞(犬肾细胞),流感病毒A/PR/8/34(H1N1)(甲型流感病毒),均由病毒生物技术国家工程研究中心北京金迪克生物技术研究所提供。

1.2药物与试剂

太阳城集团(1)本发明实施例26药物;

(2)病毒唑注射液,天津药业集团新郑股份有限公司;

太阳城集团(3)达菲,上海罗氏制药有限公司;

(4)DMEM培养基,北京清大天一生物技术有限公司;

(5)小牛血清,杭州四季青药物试剂有限公司;

(6)胰酶、四甲基偶氮唑兰(MTT)均购自Amresco公司;

(7)DMSO购自Sigma公司。

1.3受试动物

太阳城集团BALB/c小鼠,清洁级,体重:14~16g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

1.4仪器

(1)96孔细胞培养板,Corning公司;超净工作台,北京瑞泽康生物科技有限公司;

(2)CO2恒温培养箱,日本SANYO公司;

太阳城集团(3)倒置显微镜,日本OLYMPUS公司;

(4)酶标仪,美国伯乐公司。

2.实验方法

2.1药物对细胞毒性实验

96孔细胞板中每孔接种约5×104个MDCK细胞,于37℃,5%CO2培养箱中培养过夜,弃去细胞培养液,加入实施例26药物20μL(3.68mg/mL)于37℃,5%CO2培养箱中培养5天,光学显微镜下观察细胞形态,同时设立病毒唑(40μg/mL)和无药物的阴性对照。于第5天每孔中加入10μL 5mg/mL MTT溶液,继续培养4h,弃去培养液后加入100μL DMSO,37℃振荡10min,测定570nmA(吸光度)值。设立4孔平行,取4个吸光度平均值进行计算,观察实施例26药物对细胞的毒性。试验重复三次。

2.2体外抗病毒实验

太阳城集团2.2.1抗病毒病变观察

太阳城集团在24孔板中培养的MDCK细胞上加入流感病毒(A/PR/8/34)5TCID50,在33℃5%CO2温箱内孵育1h,Hanks液洗去病毒液,加入细胞维持液(实施例26药物:3.68mg/mL,100μL;病毒唑:40μg/mL,100μL),同时设病毒对照、细胞对照,置33℃5%CO2培养箱内培养,连续观察5天。

太阳城集团2.2.2空斑形成抑制实验

在六孔板中刚长满的单层MDCK细胞,弃去生长液,用Hanks液洗涤两遍,根据流感病毒A/PR/8/34的预实验空斑滴定结果,每孔加入10-6倍稀释的流感病毒0.5mL,于33℃,5%CO2温箱内孵育1h,洗去病毒液,加入适量病毒唑(终浓度40μg/mL,20μg/mL,10μg/mL,5μg/mL,2.5μg/mL,一孔为空白对照),实施例26药物(终浓度368μg/mL,184μg/mL,92μg/mL,46μg/mL,23μg/mL,一孔为空白对照),加入含1%琼脂糖、5μg/mL TPCK(L-苯甲磺酰苯丙氨酰氯甲酮)处理的胰酶、2.5%Herps缓冲液、pH 7.2-7.4的DMEM琼脂糖第一层覆盖液覆盖细胞,继续在33℃,5%CO2温箱内孵育。培养72h后,加入含3.33%中性红的第二层覆盖液过夜染色,直接观察空斑。根据空斑数目计算每一浓度相对于阴性对照的抑制率,计算其IC50。以病毒唑作为空斑形成抑制活性的阳性参照。

2.3体内抗病毒实验

太阳城集团首先做预实验测定流感病毒(A/PR/8/34)的LD50。80只小鼠随机分为4组,每组20只。即(1)正常对照组:ig给予蒸馏水,(2)模型组:ig给予蒸馏水,(3)阳性组:ig给予达菲水溶液,剂量为20mg/kg,(4)实施例26药物:ig给予实施例26药物,剂量为10g生药/kg,体积均为10mL/kg。分别于攻毒前4h及攻毒后连续给药5d,每天1次。乙醚麻醉后,10LD50剂量鼻腔接种流感病毒50μL。每组取10只连续观察14d,记录小鼠死亡情况(计算死亡率及平均生存太阳城集团),另外10只分别于首次给药后4、8d将小鼠处死,无菌取肺,测定鼠肺湿重,鼠肺研磨成肺悬液后测定TCID50,鼠肺经甲醛固定后做组织切片,HE染色,光镜下观察肺组织形态学变化。结果用SPSS统计学软件处理,计数资料用χ2检验,计量资料采用t检验进行组间比较,结果用表示。

3.实验结果

太阳城集团3.1药物对细胞毒性实验

三次试验结果显示,在本实验条件下,实施例26药物20uL(3.68mg/mL)时,细胞状态和阴性对照组一致,没有细胞毒性;阳性对照药物病毒唑40μg/mL对细胞无任何毒性,选此浓度进行体外试验。

3.2体外抗病毒实验

3.2.1抗病毒病变观察

结果见表23,结果表明,实施例26药物在体外具有一定抑制流感病毒致细胞病变作用。

表23实施例26药物对病毒致细胞病变作用的影响

注:-无细胞病变;±延缓细胞病变;+1/4以下细胞病变;++1/4-1/2的细胞有病变;+++1/2-3/4的细胞有病变;++++3/4以上的细胞有病变。

3.2.2空斑形成抑制实验

太阳城集团结果见表24,结果表明,在本实验条件下,实施例26药物的IC50为75μg/mL,说明在体外可以抑制流感病毒生长,具有一定的抗流感病毒作用。

表24实施例26药物对流感病毒的空斑形成抑制作用

3.3体内抗病毒实验

太阳城集团3.3.1对小鼠生存率和平均生存太阳城集团的影响

模型组在攻毒后的第5d开始死亡,到第10d存活率为0,平均生存太阳城集团为7.1d;实施例26药物组在攻毒后的第6d开始死亡,到第8d存活率降到最低,存活率为50%,与模型组比较具有显著性差异(P<0.01),平均生存太阳城集团为10.6d;阳性组及正常对照组存活率均为100%,平均生存太阳城集团大于14d,与模型组比较具有显著性差异(P<0.01)。结果见表25。

表25实施例26药物对小鼠生存率和平均生存太阳城集团的影响(n=10)

与模型组比较:**P<0.01。

3.3.2染毒后小鼠肺内病变情况

结果见表26,实验结果表明,与模型组比较,实施例26药物组的小鼠肺湿重及肺病毒滴度均显著下降(P<0.05)。

表26实施例26药物对10LD50流感病毒染毒小鼠的保护作用

与正常对照组比较:**P<0.01;与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01

3.3.3对病毒感染小鼠肺病理变化的影响

太阳城集团实验结果:模型组肺组织有大面积的肺实变,肺泡间隔明显增宽,有大量淋巴细胞浸润,可见肺泡上皮细胞增生和肺泡缩小,肺组织含气量显减少,肺泡腔有液体渗出与出血灶;实施例26药物组小鼠肺组织病变较模型组减轻,肺泡间隔略有增宽,可见淋巴细胞浸润,显示出一定的保护效应。

4.结论

本试验结果表明,本发明实施例26药物在一定浓度下,没有任何细胞毒性;实施例26药物在体外可以抑制流感病毒生长,具有一定的抗流感病毒作用;在小鼠攻毒保护实验中通过存活率、平均存活太阳城集团、鼠肺实变、鼠肺内病毒TCID50滴度及鼠肺病理切片等多个参数评定显示实施例26药物具有一定的抗流感病毒活性。

太阳城集团实验例9:对乙型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

取ICR小鼠240只,体重18~22g,各半。

取ICR小鼠120只,随机分6组,每组20只。正常对照组(灌胃)、模型组(灌胃)、双黄连口服液组(10mL/kg)和实施例5药物I、II、III组(2.5g生药/kg体重、5.0生药/kg体重、10.0生药/kg体重)。以上各组小鼠均灌胃给药。

给药1h后除空白对照组外,其余各组在乙醚浅麻醉下,以血凝试验640以上的尿囊液给小鼠滴鼻感染,每鼠40μl(20个LD50致死量),观察14天内动物感染后发病及死亡情况,见表27。

太阳城集团表27实施例5药物灌胃对乙型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

太阳城集团##p<0.01与空白对照组比较;*p<0.05**p<0.01与模型组比较

太阳城集团实验结果显示:本发明实施例5药物可明显延长乙型流感病毒感染小鼠的存活天数,也可降低甲型流感病毒感染小鼠死亡数。表明本发明中药组合物对乙型流感病毒感染小鼠具有一定的保护作用。

实施例10:对乙型流感病毒感染小鼠肺病变的影响

太阳城集团取ICR小鼠120只,体重13~16g,各半。

取ICR小鼠60只,随机分6组,每组10只。正常对照组(灌胃)、模型组(灌胃)、利巴韦林组(0.5g/kg)和实施例28药物I、II、III组(2.5g生药/kg体重、5.0生药/kg体重、10.0生药/kg体重)。以上各组小鼠均灌胃给药,1次/天×5天。

除空白对照组外,其余各组于给药第1天,在乙醚浅麻醉下以病毒尿囊液滴鼻感染小鼠,每鼠30μl(20个LD50攻击量)。然后继续给药5天。末次给药后将小鼠禁食(不禁水),次日进行下列实验:取肺,用1%甲醛溶液固定后,常规取材,脱水,石蜡包埋,制片,HE染色后作病理组织学检查,观察肺部病变程度。实验结果如下见表28。

表28实施例28药物对乙型流感病毒感染小鼠肺病变的影响

#p<0.01与正常对照组比较;*p<0.05**p<0.01与模型组比较

注:1.病变积分根据病变程度不同,依次标记为“-”、“+”、“++”、“+++”、“++++”。“-”为无明显改变,记为0分;“+”为轻度病变改变,记为1分;“++”为中度病理改变,记为2分;“+++”为重度病理改变,记为3分;“++++”为极重度病理改变,记为4分。积分值越高,表示病变程度越重。2.统计采用秩和检验。

实验结果表明:本发明实施例28药物能减轻乙型流感病毒所致小鼠的肺部感染,具有抗乙型流感病毒的作用。

本发明的有益效果:

1.在本发明中药组合物中,采用鱼腥草、金银花清热解毒,疏风清热;采用具有清热凉血散瘀之功的赤芍,清解血分热邪,截断病证从气分向血分的传变,配伍赤芍、艾叶、薄荷,既善清肺热之邪以疏风透热,又能暖气血而温经脉,逐寒湿而止冷痛,主要用于治疗中医外感风热型的普通感冒和流行性感冒,组方虽然简单,但疗效显著。

2.根据本发明中药组合物处方药味中指标成分、有效成分的理化性质,本发明提供了制备方法,制备方法不仅简单易行,而且能够充分地提取出药材中的有效成份。

3.本发明提供了多种药物剂型的制备方法,将本发明中药组合物制备成一定的药物剂型,能够更加方便地使用。根据流行性感冒的传变特点,本发明中药组合物优选的剂型为喷雾剂,制成喷雾剂后,药物可通过口腔颊面粘膜和舌下吸收,具有吸收快,迅速缓解咽干、咽痛等不适感觉,无肝脏首过效应等优点,局部用药“药力直达病所”,吞咽下的部分药物亦能发挥全身作用。

附图说明:

无。

具体实施方式:

实施例1:硬胶囊剂

处方:鱼腥草600g、金银花600g、赤芍200g、薄荷100g、艾叶100g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水5倍量,水蒸汽蒸馏2小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水5倍,回流提取1次,每次0.5小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入80%乙醇至乙醇浓度为65%,冷藏,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液,加入适量糊精,制粒,50℃烘干,加入挥发油乙醇溶液,整粒,装胶囊,制1000粒,即得成品。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4粒。

实施例2:滴丸剂

太阳城集团处方:鱼腥草800g、金银花800g、赤芍400g、薄荷200g、艾叶200g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水8倍量,水蒸汽蒸馏4小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液1,备用;药渣加入赤芍,加水8倍,回流提取2次,每次1小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入85%乙醇至乙醇浓度为70%,冷减,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,与聚乙二醇-4000以1∶3的比例熔融混合,甲基硅油作冷却剂,滴制成滴丸1000丸,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4丸。

实施例3:颗粒剂

处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水10倍量,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水10倍,回流提取2次,每次1.5小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入90%乙醇至乙醇浓度为75%,冷藏,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液,加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中的一种或多种),干燥,粉碎,加入合适的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、微晶纤维素等或液体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆、糖浆等一种或多种),加入挥发油乙醇溶液,制粒,整粒,制成颗粒剂5000g,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次10g~20g。

实施例4:片剂

处方:鱼腥草700g、金银花600g、赤芍400g、薄荷200g、艾叶400g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水13倍量,水蒸汽蒸馏8小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水13倍,回流提取2次,每次2小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入95%乙醇至乙醇浓度为75%,冷藏,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液,加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇及其他药剂学常用的稀释辅料等一种或多种),混合,于燥,粉碎,加入适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等或液体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆等一种或多种),制颗粒,加入润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富马酸钠等一种或多种),加入挥发油乙醇溶液,整粒,总混,压制成1000片,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4片。

实施例5:软胶囊

太阳城集团处方:鱼腥草800g、金银花800g、赤芍500g、薄荷300g、艾叶500g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水15倍量,水蒸汽蒸馏10小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水15倍,回流提取3次,每次3小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入100%乙醇至乙醇浓度为75%,冷藏,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液,加入合适的辅料(如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500及植物油系列等,防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等;增溶剂如吐温系列等一种或多种,抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等一种或多种),加入挥发油乙醇溶液,以任何方式混匀后,装入胶囊中,制成1000粒软胶囊,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4粒。

实施例6:口服液

处方:鱼腥草600g、金银花600g、赤芍200g、薄荷200g、艾叶200g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水5倍量,水蒸汽蒸馏2小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水5倍,回流提取1次,每次0.5小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入80%乙醇至乙醇浓度为65%,冷藏,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液,加水稀释,滤过,加入挥发油乙醇溶液,混匀,加入到沸水里,热处理适当太阳城集团,冷藏,滤过,加入辅料娇味剂的如蔗糖、蜂蜜、木糖醇、甜菊糖、麦芽糖醇等一种或多种;防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等一种或多种;增溶剂如吐温系列等,抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等等一种或多种),滤过,灌封,制成10000mL,灭菌,即得。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次10mL~20mL。

实施例7:浓缩丸

太阳城集团处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水10倍量,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水10倍,热回流提取1次,每次1小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入95%乙醇至乙醇浓度为70%,冷臧,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液,干燥、粉碎、加入挥发油乙醇溶液,混匀,泛制成丸,低温干燥,制成浓缩丸5000粒,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次10粒~20粒。

实施例8:喷雾剂

处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水10倍量,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水10倍,热回流提取1次,每次1小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入95%乙醇至乙醇浓度为70%,冷藏过夜,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,加水,滤过,加0.05%羟苯乙酯,1.5%甜菊苷,灭菌,分装于20ml的喷雾瓶中即得。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:喷入咽喉;每4~5小时一次,每次1~2喷(1mL~2mL)。

实施例9:咀嚼片

处方:鱼腥草700g、金银花600g、赤芍400g、薄荷200g、艾叶200g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水15倍量,水蒸汽蒸馏10小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水15倍,回流提取3次,每次3小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入100%乙醇至乙醇浓度为75%,冷藏,冷臧液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液,混匀,加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖或甘露糖醇等稀释辅料中的一种或多种)混合,干燥,粉碎,得细粉与适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等等或液体粘合剂如乙醇、淀粉浆、糊精浆等一种或多种)混合制颗粒,加入适量矫味剂(如甘露醇、蔗糖、木糖醇、甜菊糖、麦芽糖醇、薄荷脑、四丁醇、橙皮油、桂皮油、各种香精等一种或多种)、润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富马酸钠、月桂醇硫酸镁等一种或多种)、崩解剂(如羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、预胶化淀粉、微晶纤维素、大豆多糖、海藻酸、处理琼脂等一种或多种),加入挥发油乙醇溶液,整粒,总混,压制成1000片,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4片。

实施例10:硬胶囊剂

处方:鱼腥草300g、金银花300g、赤芍100g、薄荷50g、艾叶100g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加60%乙醇5倍量,回流提取1次,每次0.5小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液干燥,得干膏,加入适量糊精,用制粒,50℃烘干,整粒,装胶囊,制1000粒,即得成品。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4粒。

实施例11:滴丸剂

太阳城集团处方:鱼腥草400g、金银花400g、赤芍200g、薄荷100g、艾叶100g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加65%乙醇8倍量,回流提取2次,每次1小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液与聚乙二醇-4000以1∶3的比例熔融混合,甲基硅油作冷却剂,滴制成滴丸1000丸,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4丸。

实施例12:颗粒剂

处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加70%乙醇10倍量,回流提取3次,每次3小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液干燥,得干膏,加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中的一种或多种),干燥,粉碎,加入合适的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、微晶纤维素等或液体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆、糖浆等一种或多种),制粒,整粒制成颗粒剂5000g,即得。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次10g~20g。

实施例13:片剂

处方:鱼腥草700g、金银花600g、赤芍400g、薄荷200g、艾叶400g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,75%乙醇13倍量,热回流提取4次,每次4小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液干燥,得干膏,粉碎,加入适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等或液体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆等一种或多种),制颗粒,加入润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富马酸钠等一种或多种),整粒,总混,压制成1000片,即得。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4片。

实施例14:软胶囊

处方:鱼腥草800g、金银花800g、赤芍500g、薄荷300g、艾叶500g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加80%乙醇15倍量,回流提取5次,每次5小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液加入合适的辅料(如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500及植物油系列等,防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等;增溶剂如吐温系列等一种或多种,抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等一种或多种),以任何方式混匀后,装入胶囊中,制成1000粒软胶囊,即得。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4粒。

实施例15:口服液

太阳城集团处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷200g、艾叶200g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加75%乙醇5倍量,热回流提取5次,每次5小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液干燥,得干膏,粉碎,混匀,加入到沸水里,热处理适当太阳城集团,冷藏,滤过,加入辅料娇味剂(如蔗糖、蜂蜜、木糖醇、甜菊糖、麦芽糖醇等一种或多种;防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等一种或多种;增溶剂如吐温系列等,抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等等一种或多种),滤过,灌封,制成10000mL,灭菌,即得。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次10mL~20mL。

实施例16:喷雾剂

处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加70%乙醇10倍量,回流提取3次,每次3小时,提取液合并,过滤,滤液加0.05%羟苯乙酯,1.5%甜菊苷,灭菌,分装于20ml的喷雾瓶中即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:喷入咽喉;每4~5小时一次,每次1~2喷(1mL~2mL)。

实施例17:咀嚼片

处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷200g、艾叶100g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加65%乙醇15倍量,回流提取1次,每次1小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液干燥,得干膏,粉碎,得细粉与适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等等或液体粘合剂如乙醇、淀粉浆、糊精浆等一种或多种)混合制颗粒,加入适量矫味剂(如甘露醇、蔗糖、木糖醇、甜菊糖、麦芽糖醇、薄荷脑、四丁醇、橙皮油、桂皮油、各种香精等一种或多种)、润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富马酸钠、月桂醇硫酸镁等一种或多种)、崩解剂(如羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、预胶化淀粉、微晶纤维素、大豆多糖、海藻酸、处理琼脂等一种或多种)整粒,总混,压制成1000片,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4片。

实施例18:口含片

太阳城集团处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷,加水10倍量,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,用少量乙醇溶解,得挥发油乙醇溶液,备用;水蒸汽蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加入赤芍,加水10倍,回流提取1次,每次1小时,提取液滤过,与水提液I合并,浓缩;浓缩液加入95%乙醇至乙醇浓度为70%,冷藏过夜,冷藏液过滤,得滤液,滤液回收乙醇,得浓缩液;浓缩液加入挥发油乙醇溶液,浓缩,加入适量甘露醇、阿斯巴甜和硬脂酸镁,混匀,50℃的干燥温度,压制成1000片,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口含,每日4~6次,每次1~2片。

实施例19:口含片

太阳城集团处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加60%乙醇10倍量,回流提取3次,每次3小时,提取液合并,过滤,滤液浓缩,浓缩液干燥,得干膏,粉碎,得细粉,加入70%乙醇润湿,再加入适量甘露醇、阿斯巴甜和硬脂酸镁,混匀,60℃的干燥温度,压制成1000片,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口含,每日4~6次,每次1~2片。

实施例20:硬胶囊剂

处方:鱼腥草300g、金银花500g、赤芍100g、薄荷50g、艾叶200g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加5倍量水,水蒸汽蒸馏4小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加12倍量水,加热密闭提取5次,每次2h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.10,离心4000转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入适量糊精,用制粒,50℃烘干,整粒,装胶囊,制1000粒,即得成品。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4粒。

实施例21:滴丸剂

处方:鱼腥草400g、金银花400g、赤芍200g、薄荷200g、艾叶100g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加8倍量水,水蒸汽蒸馏5小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加10倍量水,加热密闭提取4次,每次1.5h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,均匀,与聚乙二醇-4000以1∶3的比例熔融混合,加入β-环糊精包合物,甲基硅油作冷却剂,滴制成滴丸1000丸,即得。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4丸。

实施例22:颗粒剂

处方:鱼腥草400g、金银花400g、赤芍200g、薄荷100g、艾叶100g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加10倍量水,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加8倍量水,加热密闭提取3次,每次1h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎,加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中的一种或多种),干燥,粉碎,加入合适的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、微晶纤维素等或液体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆、糖浆等一种或多种),制粒,加入挥发油包合物,混合均匀,整粒制成颗粒剂5000g,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次10g~20g。

实施例23:片剂

处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加12倍量水,水蒸汽蒸馏7小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加6倍量水,加热密闭提取2次,每次0.5h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等或液体粘合剂如乙醇、明胶浆、淀粉浆等一种或多种),制颗粒,加入润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富马酸钠等一种或多种),整粒,总混,压制成1000片,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4片。

实施例24:软胶囊

处方:鱼腥草700g、金银花600g、赤芍400g、薄荷200g、艾叶400g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加14倍量水,水蒸汽蒸馏7.5小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加5倍量水,加热密闭提取1次,每次0.5h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.08,离心3800转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入适量辅料(如二氧化硅、糊精、淀粉、磷酸盐、碳酸盐、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇等稀释辅料中的一种或多种),干燥,粉碎,与合适的辅料(如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500及植物油系列等,防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等;增溶剂如吐温系列等一种或多种,抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等一种或多种),以任何方式混匀后,装入胶囊中,制成1000粒软胶囊,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4粒。

实施例25:口服液

处方:鱼腥草300g、金银花300g、赤芍100g、薄荷50g、艾叶100g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加15倍量水,水蒸汽蒸馏8小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷臧过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加4倍量水,加热密闭提取1次,每次0.5h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.06,离心3700转/min,25min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入到沸水里,热处理适当太阳城集团,冷藏,滤过,加入辅料娇味剂(如蔗糖、蜂蜜、木糖醇、甜菊糖、麦芽糖醇等一种或多种;防腐剂如山梨酸或钾盐、苯甲酸和丙酸等一种或多种;增溶剂如吐温系列等,抗氧化剂如亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠等等一种或多种),滤过,灌封,制成10000mL,灭菌,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:口服,每日2~3次,每次10mL~20mL。

实施例26:喷雾剂

太阳城集团处方:鱼腥草800g、金银花800g、赤芍500g、薄荷300g、艾叶500g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加11倍量水,水蒸汽蒸馏6.5小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加9倍量水,加热密闭提取4次,每次1.5h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.06,离心3600转/min,30min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入到沸水里,热处理适当太阳城集团,冷藏,过滤,滤液加0.05%羟苯乙酯,1.5%甜菊苷,灭菌,分装于20mL的喷雾瓶中即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

太阳城集团用法用量:喷入咽喉;每4~5小时一次,每次1~2喷(1mL~2mL)。

实施例27:咀嚼片

处方:鱼腥草500g、金银花400g、赤芍300g、薄荷200g、艾叶100g

制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加13倍量水,水蒸汽蒸馏4.5小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加12倍量水,加热密闭提取5次,每次2h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.03,离心3200转/min,35min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,与适量的粘合剂(固体粘合剂如PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、PEG1000、PEG1500、高分子材料聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠等等或液体粘合剂如乙醇、淀粉浆、糊精浆等一种或多种)混合制颗粒,加入适量矫味剂(如甘露醇、蔗糖、木糖醇、甜菊糖、麦芽糖醇、薄荷脑、四丁醇、橙皮油、桂皮油、各种香精等一种或多种)、润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、硬脂富马酸钠、月桂醇硫酸镁等一种或多种)、崩解剂(如羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、预胶化淀粉、微晶纤维素、大豆多糖、海藻酸、处理琼脂等一种或多种)整粒,总混,压制成1000片,即得。

主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口服,每日2~3次,每次2~4片。

实施例28:口含片

太阳城集团处方:鱼腥草500g、金银花500g、赤芍300g、薄荷100g、艾叶200g

太阳城集团制备方法:取鱼腥草、金银花、艾叶、薄荷、赤芍,加10倍量水,水蒸汽蒸馏6小时,收集挥发油,挥发油用β-环糊精包合,冷藏过夜,滤过,低温干燥,即得β-环糊精包合物,备用;水蒸气蒸馏提取液滤过,得水提液I,备用;药渣加8倍量水,加热密闭提取3次,每次1h,提取液与水提液I合并,浓缩至相对密度1.05,离心3500转/min,20min,取上清液继续浓缩至稠膏,减压干燥;干燥物粉碎与挥发油包合物混合均匀,加入蔗糖粉、淀粉、阿司帕坦、巧克力香精,混匀后加入含10%聚乙烯基吡咯烷酮的85%乙醇溶液,制粒,干燥后整粒,加入0.3%硬脂酸镁,混合均匀,制成口含片1000片。

太阳城集团主治:用于治疗普通感冒及流行性感冒。

用法用量:口含,每日4~6次,每次1~2片。

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