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一种具有抗舌鳞癌作用的中药复方及其制备方法.pdf

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一种 具有 抗舌鳞癌 作用 中药 复方 及其 制备 方法
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摘要
申请专利号:

太阳城集团CN201210193160.3

申请日:

20120613

公开号:

CN102670986A

公开日:

20120919

当前法律状态:

有效性:

有效

法律详情:
IPC分类号: A61K36/898,A61P35/00,A61P1/02 主分类号: A61K36/898,A61P35/00,A61P1/02
申请人: 南京中医药大学
发明人: 张军峰,詹瑧,张旭,冯颖,孟玉芬
地址: 210029 江苏省南京市汉中路282号
优先权: CN201210193160A
专利代理机构: 南京经纬专利商标代理有限公司 代理人: 杨海军
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法律状态
申请(专利)号:

CN201210193160.3

授权太阳城集团号:

法律状态太阳城集团日:

法律状态类型:

摘要

太阳城集团本发明公开了一种具有抗舌鳞癌作用的中药复方及其制备方法,该中药复方由下列重量份数的原料制成:冬瓜子10~20份、法半夏12~24份、胆南星10~20份、山茨菇12~24份、猫爪草10~20份、金荞麦10~20份、鱼腥草10~20份,仙鹤草15~30份、苏木12~24份、红花15~30份、沙参10~20份、玉竹10~20份、麦冬10~20份。本发明提供的具有抗舌鳞癌作用的中药复方,根据中医药理论和舌磷癌的发病机制选取原料配伍组方,各组份配比科学合理,药理实验结果表明本发明提供的中药复方能明显降低PGE2的含量,具有很好的抗舌磷癌的作用,长期使用无不良反应,有望开发成为新一代抗舌磷癌的药物。

权利要求书

太阳城集团1.一种具有抗舌鳞癌作用的中药复方,其特征在于,它是由下列重量份数的原料制成:冬瓜子10 ~20份、法半夏12~24份 、胆南星10~20份、山茨菇12~24份、猫爪草10~20份、金荞麦10~20份、鱼腥草10~20份,仙鹤草15 ~30份、苏木12~24份、红花15 ~30份、沙参10 ~20份、玉竹10 ~20份、麦冬10~20份。2.根据权利要求1所述的具有抗舌鳞癌作用的中药复方,其特征在于,它是由下列重量份数的原料制成:冬瓜子10份、法半夏12份 、胆南星10份、山茨菇12份、猫爪草10份、金荞麦10份、鱼腥草10份,仙鹤草15份、苏木12份、红花15份、沙参10份、玉竹10份、麦冬10份。3.权利要求1或2所述的具有抗舌鳞癌作用的中药复方的制备方法,其特征在于包括以下步骤:取权利要求1或2所述重量份数的中药复方,加6至10倍量的水煎煮1至3次,每次1至3小时,合并提取液,过滤,取滤液、浓缩,得浓缩液,加入正丁醇萃取2至4次,得到正丁醇萃取液,浓缩,得到正丁醇活性部位。4.根据权利要求3所述的具有抗舌磷癌作用的多糖提取物的制备方法,其特征在于,正丁醇的用量为浓缩液体积的2至5倍。5.权利要求1或2 所述的具有抗舌鳞癌作用的中药复方在制备防治舌鳞癌药物中的应用。6.根据权利要求5所述的具有抗舌鳞癌作用的中药复方在制备防治舌鳞癌药物中的应用,其特征在于把中药复方提取物和药学上可接受的载体制成胶囊剂、微囊、片剂、颗粒剂或口服液剂型的药物。

说明书

 

技术领域

太阳城集团本发明涉及一种中药复方,具体涉及一种具有抗舌鳞癌作用的中药复方及其在制备治疗舌磷癌药物中的应用。

背景技术

太阳城集团舌癌是口腔癌中最常见的恶性肿瘤之一。口腔癌即发生在口腔的恶性肿瘤之总称,是头颈部较常见的恶性肿瘤之一,在全世界是居第六位的常见肿瘤,大部份属于鳞状上皮细胞癌,所谓的黏膜发生变异。近年来,舌癌的发病率呈逐年上升的趋势,虽然现在舌癌的诊断和治疗水平已有很大提高,但由于舌体活动频繁,舌组织淋巴及血运丰富,因而愈后较差,其生存率仍不高。目前治疗口腔黏膜恶性肿瘤国内外医学界常规采用的治疗方案为化学药物治疗、放射治疗及手术切除等,这些方案在取得一定临床疗效的同时,随着针对舌癌发生、发展及转移机制的深入研究,也因化学药物的毒副作用、放疗造成的辐射伤害,以及手术方案性器官的全切或部分切除等导致的医源性问题和相应疾病,给患者带来了巨大的痛苦,严重影响着患者的生命健康和生活质量。 因此很有必要在传统中医药理论的指导下,研究开发出一种抗舌鳞癌效果好,不良反应低,易推广应用的中药复方制剂。

发明内容

发明目的:本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足,提供一种抗舌鳞癌效果好,副作用小、服用方便的具有抗舌鳞癌作用的中药复方,本发明的另一个目的是提供从该中药复方的制备方法和其在制备治疗舌鳞癌药物中的应用。

太阳城集团技术方案:为了实现以上目的,本发明提供的具有抗舌鳞癌作用的中药复方,它是由下列重量份数的原料制成:

冬瓜子10 ~20份、法半夏12~24份 、胆南星10~20份、山茨菇12~24份、猫爪草10~20份、金荞麦10~20份、鱼腥草10~20份,仙鹤草15 ~30份、苏木12~24份、红花15 ~30份、沙参10 ~20份、玉竹10 ~20份、麦冬10~20份。

太阳城集团作为优选方案,以上所述的具有抗舌鳞癌作用的中药复方,它是由下列重量份数的原料制成:

冬瓜子10份、法半夏12份、胆南星10份、山茨菇12份、猫爪草10份、金荞麦10份、鱼腥草10份,仙鹤草15份、苏木12份、红花15份、沙参10份、玉竹10份、麦冬10份。

本发明在中医药理论的指导下,辨证施治,并结合舌鳞癌的发病机理和发病症状,以抗癌解毒、清热利湿、理气化瘀、化痰软坚法抗癌,组方中猫爪草为养阴药,味甘、辛,微温,归肝、肺经,具有化痰散结,解毒消肿的功效;山慈姑味甘,性温,归肝、胃、脾经,药理实验结果表明具有很好的治咽喉肿痛,瘰疬,痈疽,疮肿,抗肿瘤的活性。冬瓜子味甘,性寒,具有清肺化痰,消痈排脓的功能;法半夏性辛、温,归脾、胃、肺经,具有燥湿化痰等功效;胆南星味苦、微辛,凉,归肺、肝、脾经,具有清热化痰,息风定惊,可用于痰热咳嗽,咯痰黄稠,中风痰迷,癫狂惊痫。金荞麦性凉,味辛、苦,有清热解毒、活血化瘀、健脾利湿的作用;麦门冬养阴润燥。玉竹味甘,性平。归肺;胃经;入心、肾、肺、肝、脾五脏,具有滋阴润肺,养胃生津的功效;红花性温,味辛,活血通径、散瘀止痛;仙鹤草味苦、涩,平,归心、肝经,具有收敛止血,止痢,杀虫等功效;整方对舌鳞癌患者湿浊热毒痰瘀互结,肝脾两伤,气阴两虚,气血双亏具有很好的疗效。

太阳城集团本发明所述的具有抗舌鳞癌作用的中药复方的制备方法,具体包括以下步骤:

按重量份数取中药复方,加6至10倍量的水煎煮1至3次,每次1至3小时,合并提取液,过滤,取滤液、浓缩,得浓缩液,加入正丁醇萃取2至4次,得到正丁醇萃取液,浓缩,得到正丁醇活性部位。

太阳城集团作为优选方案,以上所述的具有抗舌磷癌作用的多糖提取物的制备方法,正丁醇的用量为浓缩液体积的2至5倍。

太阳城集团本发明提供的具有抗舌鳞癌作用的中药复方在制备治疗舌鳞癌药物中的应用,可以将中药复方提取物和药学上可接受的载体制成胶囊剂、微囊、片剂、颗粒剂或口服液剂型的药物。

太阳城集团本发明提供的具有抗舌鳞癌作用的中药复方制成片剂时把抗舌鳞癌作用的中药复方和载体乳糖或玉米淀粉,需要时加入润滑剂硬脂酸镁,混合均匀,然后压片制成片剂。本发明提供的抗舌鳞癌作用的中药复方制成胶囊剂时把抗舌鳞癌作用的中药复方和载体乳糖或玉米淀粉混合均匀,整粒,然后装胶囊制成胶囊剂。本发明提供的抗舌鳞癌作用的中药复方制成颗粒剂时,把抗舌鳞癌作用的中药复方和稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀,整粒,干燥,制成颗粒剂。

太阳城集团有益效果:本发明提供的具有抗舌鳞癌作用的中药复方和现有技术相比具有以下优点:

(1)本发明提供的具有抗舌鳞癌作用的中药复方,根据中医药理论和舌鳞癌的发病机制选取原料配伍组方,各组份配比科学合理,药理实验结果表明本发明提供的中药复方具有很好的抗舌鳞癌的作用,长期使用无不良反应,且本发明提供的具有抗舌鳞癌作用的中药复方可以方便的和药学上可接受的载体制备成各种剂型的药物,方便临床服用。

(2)目前研究表明PGE2可以促进肿瘤细胞的增殖,分化,转移,抑制凋亡,促进肿瘤血管生成的作用,并且与肿瘤的免疫逃避密切相关,肿瘤中许多组织PGE2的含量都明显高于正常组。环氧合酶是前列腺素合成的关键酶,它介导由花生四烯酸合成前列腺素的起始步骤,其中PGE2是PGs的主要生物活性之一,肿瘤中增高的PGE2主要源于COX-2途径。舌鳞癌细胞中COX-2表达呈强阳性,细胞中PGE2含量的多少与COX-2的活性关系密切。特异性COX-2抑制剂能够明显减少舌鳞癌细胞培养上清液中PGE2的含量和相关蛋白的表达,对舌鳞癌细胞增殖具有抑制作用。本发明使用ELASA法测定细胞中上清液中PGE2的含量,结果显示,随着药物浓度的增加,舌鳞癌细胞SAS、TCA-8113细胞培养上清PGE2的含量减少(P<0.05),结合MTT法与流式细胞术的结果,表明本发明提供的中药复方能抑制舌鳞癌细胞PGE2的分泌与促进细胞凋亡。 

具体实施方式

太阳城集团根据下述实施例,可以更好地理解本发明。然而,本领域的技术人员容易理解,实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明,而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。

实施例1  

1、具有抗舌鳞癌作用的中药复方,它是由下列重量份数的原料制成:

冬瓜子10份、法半夏12份、胆南星10份、山茨菇12份、猫爪草10份、金荞麦10份、鱼腥草10份,仙鹤草15份、苏木12份、红花15份、沙参10份、玉竹10份、麦冬10份。

2、具有抗舌鳞癌作用的中药复方的制备方法为:

取冬瓜子10份、法半夏12份、胆南星10份、山茨菇12份、猫爪草10份、金荞麦10份、鱼腥草10份,仙鹤草15份、苏木12份、红花15份、沙参10份、玉竹10份、麦冬10份,加10倍量的水煎煮3次,每次2小时,合并提取液,过滤,取滤液、浓缩,得浓缩液,加入3倍正丁醇萃取4次,得到正丁醇萃取液,浓缩,得到正丁醇活性部位,加入玉米淀粉,加入润滑剂硬脂酸镁,混合均匀,然后压片制成片剂。

实施例2  

太阳城集团1、具有抗舌鳞癌作用的中药复方,它是由下列重量份数的原料制成:

冬瓜子20份、法半夏24份、胆南星20份、山茨菇24份、猫爪草20份、金荞麦20份、鱼腥草20份,仙鹤草30份、苏木24份、红花30份、沙参20份、玉竹20份、麦冬20份。

2、具有抗舌鳞癌作用的中药复方的制备方法为:

取冬瓜子20份、法半夏24份、胆南星20份、山茨菇24份、猫爪草20份、金荞麦20份、鱼腥草20份,仙鹤草30份、苏木24份、红花30份、沙参20份、玉竹20份、麦冬20份,加8倍量的水煎煮2次,每次3小时,合并提取液,过滤,取滤液、浓缩,得浓缩液,加入5倍正丁醇萃取4次,得到正丁醇萃取液,浓缩,得到正丁醇活性部位,加入载体乳糖或玉米淀粉混合均匀,整粒,然后装胶囊制成胶囊剂。

实施例3 抗舌磷癌实验研究

1、材料

1.1 细胞株: SAS细胞由哈尔滨医科大学郑金华教授惠赠,舌鳞癌细胞株TCA-8113,购自中国科学院上海细胞库,本实验室传代、保存。

太阳城集团1.2  药物:本发明实施1提供的中药复方提取物。

1.3  主要试剂  青霉素(山东鲁抗),硫酸链霉素(Amresco),MTT(噻唑盐,Genebase),胰蛋白酶(南京生兴),EDTA(Sigma),RPMI-1640培养基 (GIBCO),碘化丙啶(PI,Sigma,美国),RPMI-1640 (GIBCO), 新生小牛血清(兰州民海,Hyclone合资),6孔培养板及24孔板(Corning产品)。PEG2检测ELISA试剂盒(R&D公司)。

太阳城集团1.4  仪器  超净工作台(苏净公司,SW-CJ-1F),CO2培养箱(美国Thermo),倒置显微镜(Olympus,X41),酶标仪(Bio-Teck,POWERWAVE340)。流式细胞仪FAC SCantoTM及分析软件ModFit LT 3.0(BD公司,美国)。

2、方法

太阳城集团2.1  细胞培养及传代  SAS、TCA-8113细胞株用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液(青霉素100μg/ml,硫酸链霉素100μg/ml),置37℃、5% CO2、100%湿度的培养箱常规培养,传代。

太阳城集团2.2  MTT法测细胞活性  取对数生长期(约90%铺满)的SAS、TCA-8113细胞,制备细胞悬液5×105/ml,接种于96孔板,每孔加100ul,18~24h铺满后弃上清,用PBS洗2次,除尽血清,将实施提供的中药复方提取物按生药浓度160、80、40、20、10 mg/ml的含药RPMI-1640液,不加药物的RPMI-1640液作为对照,设4个重复孔。培养72h后,弃去培养上清,加入含0.5mg/ml MTT的PBS溶液,继续培养4h,弃上清后,每孔加200μl二甲基亚砜(DMSO),充分溶解甲瓒颗粒后,酶标仪490nm检测OD值。计算不同浓度的中药提取物对TCA-8113和SAS细胞的增殖抑制率,试验重复三次,计算增殖活性抑制率。

太阳城集团2.3  ELISA检测培养上清PGE2含量  取用实施1提供的中药复方提取物作用的SAS、TCA-8113细胞培养上清,室温平衡1h后,3000rps×10min离心除去沉淀,留取细胞培养上清,严格按照试剂盒操作说明检测细胞培养上清PGE2含量。

太阳城集团2.4  统计学分析  所有数据用SPSS 13.0软件进行分析,用mean±s表示,进行t-test检验,P<0.05 表示具有统计学意义,P<0.01表示具有显著统计学意义。

3 结果

太阳城集团3.1  对细胞增殖活性的抑制作用:

太阳城集团  不同浓度的中药提取物能够抑制SAS、TCA-8113细胞生长,并且抑制率与浓度呈剂量依赖关系。具体实验结果如表1所示:

太阳城集团表1 中药提取物作用72h对SAS、TCA-8113细胞增殖活性的抑制作用(平均数±s,n=4)

太阳城集团注:与无血清对照相比,* P<0.05

3.2 中药提取物抑制细胞分泌PGE2的作用  

太阳城集团中药提取物对SAS、TCA-8113细胞中PGE2的释放均有抑制作用。在SAS细胞组中,PGE2含量在低浓度(40mg/ml)时与对照组相比有显著降低(t=4.45,P<0.05),提示40 mg/ml抑制SAS细胞分泌PGE2作用效果最好,随着浓度升高,抑制效果下降,但统计学差异不显著(P>0.05)。在TCA-8113细胞组中,细胞中PGE2含量呈剂量依赖性,且当浓度为160mg/ml时统计学差异显著(P<0.05)。

太阳城集团表2 实施例1中药提取物对舌鳞癌细胞分泌PGE2的影响(平均数±s,n=4)

PGE2浓度 40 mg/ml 80 mg/ml 160 mg/ml 无血清对照组 SAS 151.09±4.61* 154.35±39.97 159.78±13.84 210.87±18.45 TCA-8113 181.52±22.25 175.00±35.55 152.26*±15.17* 196.43±5.05

注:与无血清对照相比,*P<0.05

太阳城集团由表1的实验结果表明,本发明提供的中药复方提取物具有很好的抑制人舌磷癌的作用,并且用ELASA法测定细胞中上清液中PGE2的含量,结果显示,随着药物浓度的增加,SAS、TCA-8113细胞培养上清PGE2的含量减少(P<0.05),由表2的实验结果表明,本发明提供的中药复方提取物还能明显抑制PGE2的分泌,从而能发挥促进舌磷癌细胞凋亡的作用。

本发明根据中医药理论辨证施治,根据舌磷癌的发病机理,进行科学组方,细胞实验研究结果证明本发明提供的中药复方具有很好的抗舌磷癌作用,因此本发明提供的中药复方有望开发成为新一代防治舌磷癌的药物。

太阳城集团以上实施方式只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此项技术的人了解本发明内容并加以实施,并不能以此限制本发明的保护范围,凡根据本发明精神实质所做的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围内。

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