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新型的特异性细胞免疫应答体外检测方法及其临床应用.pdf

摘要
申请专利号:

CN201410122051.1

申请日:

2014.03.29

公开号:

CN103983785A

公开日:

2014.08.13

当前法律状态:

授权

有效性:

有权

法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/68申请日:20140329|||公开
IPC分类号: G01N33/68 主分类号: G01N33/68
申请人: 陈仁奋
发明人: 陈仁奋; 魏秀妹
地址: 350001 福建省福州市鼓楼区华林路屏东城11栋-302
优先权:
专利代理机构: 福州元创专利商标代理有限公司 35100 代理人: 蔡学俊
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法律状态
申请(专利)号:

CN201410122051.1

授权太阳城集团号:

||||||

法律状态太阳城集团日:

2015.12.30|||2014.09.10|||2014.08.13

法律状态类型:

授权|||实质审查的生效|||公开

摘要

太阳城集团本发明公开了一种新型的特异性细胞免疫应答体外检测方法及其临床应用,该方法包括Sm合成肽抗原的合成及筛选,待检血液与Sm混合肽抗原的混合培养,检测培养血上清液中特定细胞因子的水平。该检测方法可以应用于系统性红斑狼疮临床的辅助诊断和治疗监控。本发明具备多种临床应用功能,而且简便快速,容易操作,可灵活运用等特点,具有很好的应用前景。

权利要求书

权利要求书
1.  一种新型的细胞免疫应答体外检测方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)筛选并混合能被T细胞特异识别的Smith(Sm)合成肽,作为刺激待检外周血白细胞的抗原,同时设立丝裂原PHA作阳性对照;
(2)将待检血液与抗原混合,37℃培养20-24小时;
(3)检测培养血上清液中特定细胞因子的水平,以判断机体对特异性抗原Sm混合肽和非特异性免疫原丝裂原PHA的细胞免疫应答水平。

2.  如权利要求1所述的细胞免疫应答体外检测方法,其特征在于:所述的Sm混合肽抗原包含五条合成肽, 分别为Sm1、Sm2、Sm3、Sm4、Sm5 ,具体氨基酸序列如下:
Sm1: RGNNIRYFILPDSLPLDTLL;         
Sm2 :SHETVTIELKNGTQVHGTIT;   
Sm3:GVDVSMNTHLKAVKMT;           
Sm4:TVGKSSKMLQHIDYRMRCI;   
Sm5: PMGIPPGRGTPMGMPPPGM。

3.   如权利要求1、2所述的细胞免疫应答体外检测方法,其特征在于:所述的Sm合成肽抗原由FMOC固相合成方法自动或人工合成,经HPLC分析和纯化,抗原纯度90%以上。

4.  一种如权利要求1、2、3所述的细胞免疫应答体外检测方法的临床应用,其特征在于包括:
(1)通过测定待检血经Sm 混合肽刺激产生IL-6的含量,判断患者对Sm混合肽抗原的刺激是否存在高水平的细胞免疫应答,以实验诊断SLE;
(2)通过分析SLE患者经Sm混合肽抗原特异刺激后产生的细胞因子谱,为病人选择细胞因子拮抗剂进行个体化治疗提供实验参考;
(3)通过观察SLE患者外周血对丝裂原刺激所释放的细胞因子的能力,既可以评估病人的整体细胞免疫功能状态, 也可用来判定该实验结果的可靠性,以排除假阴性结果。

关 键 词:
新型 特异性 细胞 免疫 应答 体外 检测 方法 及其 临床 应用
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